NIBSC 19/304 SARS-CoV-2 RNA試劑(標(biāo)準(zhǔn)品) 返回列表頁(yè)

1.有可能的使用

用于 SARS-CoV-2 RNA 的研究試劑旨在用于開(kāi)發(fā)和評(píng)估基于核酸擴(kuò)增技術(shù) (NAT) 的檢測(cè)方法，以檢測(cè) SARS-CoV-2 序列作為陽(yáng)性對(duì)照。該材料需要提取。此材料僅供研究使用，并且僅在內(nèi)部進(jìn)行了表征。

2.內(nèi)容

每個(gè)小瓶包含 0.5 mL、冷凍、非傳染性合成 SARS-CoV 2 RNA，包裝在 1 型人類免疫缺陷病毒中

(HIV-1) 顆粒在無(wú)菌通用緩沖液中配制，包含 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、0.5% 人血清白蛋白和 1% D-(+)-海藻糖脫水物。

3.警告

NIBSC 19/304 SARS-CoV-2 RNA試劑(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動(dòng)物。

用于制備通用緩沖液的人血清白蛋白已經(jīng)過(guò)測(cè)試，發(fā)現(xiàn) HBsAg、抗 HIV

和 HCV RNA。與所有生物來(lái)源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。它

應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開(kāi)安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，

4.描述

用于制備研究試劑 19/304 的源材料是基于慢病毒載體 (LVV) 的質(zhì)粒，其中 HIV 基因已使用 [1] 中描述的類似方法，用武漢-Hu-1 分離株 (GenBank MN908947.3) SARS-CoV-2 替代。

SARS-CoV-2 基因組已分為四個(gè)重疊片段并插入 LVV 的長(zhǎng)末端重復(fù)序列中質(zhì)粒。單核苷酸突變已隨機(jī)插入 SARS-CoV-2 序列中以防止蛋白質(zhì)表達(dá)。這四種構(gòu)建體的序列已存入 GenBank：登錄號(hào) MT299802、MT299803、MT299804、MT299805。四種 LVV-SARS-CoV-2 構(gòu)建體分別與 HIV-1 一起單獨(dú)轉(zhuǎn)染到 HEK293T/17 細(xì)胞中包裝質(zhì)粒 p8.9，由 D. Trono 教授捐贈(zèng) [2]。轉(zhuǎn)染細(xì)胞上清液中含有的顆粒通過(guò)在 20% 蔗糖緩沖墊上超速離心純化并重懸于通用緩沖液中。四個(gè)基因組中的每一個(gè)使用 SARS-CoV-2 序列上游 HIV-U5 區(qū)域的常見(jiàn)序列對(duì)粒子類型進(jìn)行量化。一個(gè)四種顆粒的等摩爾混合物在通用緩沖液中配制，目標(biāo)濃度為 107 拷貝/mL。

5.貯存

小瓶在收到時(shí)應(yīng)存放在 -20℃ 或以下。避免冷凍/解凍循環(huán)。尚未對(duì)該材料進(jìn)行穩(wěn)定性研究。

6.材料的使用

NIBSC 19/304 SARS-CoV-2 RNA試劑(標(biāo)準(zhǔn)品)  在環(huán)境溫度下解凍研究試劑。研究試劑應(yīng)根據(jù)最終用戶的方法進(jìn)行處理，包括提取步驟。如果需要稀釋系列，我們建議在提取前稀釋材料。