液相色譜對復(fù)方金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測

前言

金銀花和山銀花同屬忍冬科植物，過去二者都作為金銀花入藥。近些年開始將金銀花和山銀花區(qū)別使用，兩者在藥材產(chǎn)地、性狀及歸屬、化學(xué)成分等方面都存在較大差異。在產(chǎn)地上，金銀花主產(chǎn)于北方，產(chǎn)地相對單一；山銀花主產(chǎn)于南方，產(chǎn)地分布廣泛。在外觀性狀上，金銀花呈棒狀，上粗下細(xì)，山銀花則多為長條形，略彎曲，上下粗細(xì)相差不大。兩者在化學(xué)成分上差別最為明顯，金銀花黃酮類成分含量較高，而山銀花皂苷類成分含量較高。 2005 年版《中國藥典》將金銀花、山銀花分列，主要考慮金銀花大量作為中藥注射劑的原料，而山銀花中皂苷含量較高，一般皂苷具有溶血作用，如果將山銀花與金銀花混用，存在著潛在的安全風(fēng)險。而能明顯區(qū)別兩者的是山銀花的特有成分“灰氈毛忍冬皂苷乙"。目前常用的摻雜檢測方法是使用薄層色譜法進(jìn)行初篩，高效液相色譜法補(bǔ)充驗(yàn)證，此方法準(zhǔn)確度較高，是金銀花和山銀花的有效鑒別手段。

本篇文章參考了中國食品藥品檢定研究院發(fā)布的《復(fù)方金銀花顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查法》中高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測器進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。在金銀花顆粒及藥材的樣品色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對照品色譜峰保留時間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測器滿足對金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測需求。

關(guān)鍵詞：金銀花顆粒及藥材；高效液相色譜法；蒸發(fā)光散射檢測器；灰氈毛忍冬皂苷乙。

1實(shí)驗(yàn)方法

1.1  儀器配置

表1高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

1.2 實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

乙腈：色譜純；

甲醇：色譜純；

灰氈毛忍冬皂苷乙對照品;

金銀花顆粒樣品；

金銀花藥材；

分析天平；

研缽；

微孔濾膜：0.45μm；

超聲波清洗機(jī)；

渦旋混合器。

1.3 測試條件

表2 高效液相色譜條件

1.4 溶液配制

1.4.1灰氈毛忍冬皂苷乙對照品溶液

取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每lml含0.16mg的溶液，即得。

1.4.2 金銀花顆粒供試品溶液的制備

取本品5袋金銀花顆粒中的內(nèi)容物，研細(xì)，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，稱定重量，搖勻，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.4.3 金銀花藥材供試品溶液的制備

取本品金銀花藥材，切碎研細(xì)，取10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，稱定重量，搖勻，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2    結(jié)果與討論

2.1系統(tǒng)適用性

 圖1 灰氈毛忍冬皂苷乙標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖及色譜參數(shù)

說明：由上述譜圖可見，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。

2.2 樣品測試

分別精密金銀花顆粒供試品溶液和金銀花藥材供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定。

圖2  金銀花顆粒及金銀花藥材與灰氈毛忍冬皂苷乙對照品溶液重疊色譜圖

說明：在金銀花顆粒及藥材的供試品溶液色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對照品色譜峰保留時間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測器滿足對金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測需求。

2.3 注意事項

1. 標(biāo)準(zhǔn)品需在-20℃冰箱中保存；

2.在制備相關(guān)溶液時需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。

3 結(jié)論

本篇文章參考了中國食品藥品檢定研究院發(fā)布的《復(fù)方金銀花顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查法》中高效液相色譜法色譜條件，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置蒸發(fā)光散射檢測器進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計算不低于 4000，滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。在金銀花顆粒及藥材的樣品色譜中未出現(xiàn)與灰氈毛忍冬皂苷乙對照品色譜峰保留時間相應(yīng)的色譜峰。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀搭配蒸發(fā)光散射檢測器滿足對金銀花顆粒及藥材中灰氈毛忍冬皂苷乙的檢測需求。