實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠堿性磷酸酶（AKP）水平。用純化的小鼠堿性磷酸酶（AKP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入堿性磷酸酶（AKP），再與HRP標(biāo)記的堿性磷酸酶（AKP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性磷酸酶（AKP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠堿性磷酸酶（AKP）活性濃度。

注意事項：

1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，建議做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6、底物請避光保存。

7、嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9、本試劑不同批號組分不得混用。