hFOB 1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

簡(jiǎn)稱：hFOB 1.19

中文名：人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞

別名：hFOB1.19; hFOB

種屬：人

來(lái)源：成骨細(xì)胞；SV40轉(zhuǎn)化；條件永生；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

hFOB 1.19細(xì)胞是在0.6mg/mL新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力；hFOB 1.19細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長(zhǎng)因子和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：

1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞；

2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；

（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過(guò)度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞*漂浮?；靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guò)夜后液氮保存。

參考文獻(xiàn)：

The FAPα-activated prodrug Z-GP-DAVLBH inhibits the growth and pulmonary metastasis of osteosarcoma cells by suppressing the AXL pathway(2021/8/14)

作者：Geni Ye, Maohua Huang, Yong Li

期刊：Acta Pharmaceutica Sinica B

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