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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>生化試劑盒>> 6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測(cè)定試劑盒

6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測(cè)定試劑盒
  • 6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測(cè)定試劑盒
參考價(jià)750-1400
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥750 ~ ¥1400

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • YLKBIO 品牌
  • 型號(hào)
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 下載 產(chǎn)品資料
  • 上海 所在地
規(guī)格

100管/96樣 50管/48樣

屬性

CAS:詳見說明書 純度:詳見說明書 分子量:詳見說明書 分子式:詳見說明書 供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:100管/96樣、50管/48樣 貨號(hào):YLK-SH119 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:科研

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規(guī)格
100管/96樣1400元117盒可售
50管/48樣750元99盒可售

更新時(shí)間:2024-06-29 15:46:45瀏覽次數(shù):780評(píng)價(jià)

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣、50管/48樣
貨號(hào) YLK-SH119 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 測(cè)定方法: 微量法、紫外分光光度法
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測(cè)定試劑盒測(cè)定意義:
磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,與能量的平衡、生長(zhǎng)速率和細(xì)胞活力等密切相關(guān)。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

6磷酸葡萄糖酸脫氫酶6PGDH測(cè)定試劑盒說明書

                                        微量法100T/96S

 

    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,與能量的平衡、生長(zhǎng)速率和細(xì)胞活力等密切相關(guān)。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

 

測(cè)定原理:

6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPHNADPH340 nm有特征吸收峰,而NADP+沒有;通過測(cè)定340nm吸光度增加速率,計(jì)算6PGDH活性。

 

自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體19mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。

 

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為1000~50001的比例(建議2000萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

測(cè)定操作:

1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm

2將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中充分溶解;在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3. 96孔板,依次加入10μL樣本190μL試劑一,于340nm處測(cè)定3min內(nèi)吸光值變化,第10 s吸光值記為A1,第190s吸光值記為A2A=A2-A1

注意:空白管只需要做一次。

 

計(jì)算公式:

使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

 

1、血清(漿)6PGDH活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

6PGDHnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷V÷T=2143.6×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中6PGDH活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

6PGDHnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=2143.6×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

6PGDHnmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W× V÷V樣總) ÷T=2143.6×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

6PGDHnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(2000×V÷V樣總) ÷T=1.072×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,3 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

6磷酸葡萄糖酸脫氫酶6PGDH測(cè)定試劑盒僅供科研!

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