大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 :大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1253h
組織來源 :腎上腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介:
腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當(dāng)重要的內(nèi)分泌器官,由于位于兩側(cè)腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,周圍部分是皮質(zhì),內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,分泌腎上腺素和去甲腎上/腺素。這些激素在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動(dòng)員全身的儲(chǔ)備物質(zhì),為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備。
腎上腺外部是皮質(zhì)部分,分泌醛固酮、皮質(zhì)/醇和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌,會(huì)導(dǎo)致高血壓和低血鉀。皮質(zhì)/醇是人體必需的激素之一。當(dāng)人體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時(shí)候,腎上腺皮質(zhì)分泌大量的皮質(zhì)/醇,這些皮質(zhì)/醇能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲(chǔ)能源,為應(yīng)對內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)皮質(zhì)/醇缺乏時(shí),機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候,往往缺乏足夠應(yīng)對能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄激素,對男性來講,并非必bu可少,但是對女性而言,是雄激素的一個(gè)重要來源。
細(xì)胞特性
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎上腺組織。
2)細(xì)胞鑒定:3β-HSD免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:圓形或多角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 : 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 梭形、多角形
傳代特性 : 可傳1-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。