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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> 復(fù)蘇/凍存SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc

SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc
  • SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 ATCC
  • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-13 14:27:33瀏覽次數(shù):268評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YLK-XB1640h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 英文名稱 SK-BR-3+luc
SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc1970年G. Trempe 和 L.J. Old從胸水中建立了這株細(xì)胞。沒you病毒顆粒。超微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲。SK-BR-3細(xì)胞株過表達(dá)HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。

SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc


細(xì)胞特性:

1) 來源:器官:乳腺;乳房 疾?。合侔?取材轉(zhuǎn)移灶:胸水

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)

3) 含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。


運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


細(xì)胞接收后的注意事項(xiàng):

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。


培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備McCOY's 5A或DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 注意:該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提高CO2濃度(7%-10%)。復(fù)蘇初期細(xì)胞貼壁不牢,會(huì)有懸浮細(xì)胞出現(xiàn),在傳代和換液時(shí)注意回收(1000rpm 5min)懸浮的細(xì)胞。細(xì)胞生長(zhǎng)融合到80%以后會(huì)有懸浮細(xì)胞出現(xiàn)。

3) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

4) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。


細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


SK-BR-3+luc 人乳腺腺癌細(xì)胞+luc

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