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通用名 :病毒RNA提取試劑盒(吸附柱法)
Name :Virus RNA Extraction Kit(Adsorption column method)
【產品介紹】
本試劑盒可以從多種樣本中提取RNA,包括血清、血漿、動物組織、體液等。處理的樣本通過加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通過洗滌、洗脫,即可分離出病毒RNA。
本試劑盒提取的RNA可以用于Real-time PCR,Northern Blot,Blotting Hybridization ,cDNA library Construction等實驗。
【技術信息】
方法 | 耗時 | 最大體積 | 吸附率 |
吸附柱法 | 7-15分鐘 | 750μL | ≥90% |
樣本類型 | 樣本需求量 |
血清、血漿 | 200μL |
組織勻漿上清液 | 200μL |
腹水等 | 1-10 mL |
培養(yǎng)的細胞 | ≥2×106個 |
【試劑組成】
名 稱 | 規(guī)格 |
裂解液 | 25mL |
去蛋白漂洗液 | 18mL(使用前加入12mL無水乙醇) |
洗滌液 | 12mL(使用前加入48mL無水乙醇) |
洗脫液 | 10mL |
吸附柱 | 50個 |
使用說明書 | 1份 |
【試劑規(guī)格】50T/盒。
【儲存運輸】
室溫保存,有效期12個月??墒覝叵逻\輸。
【自備材料】
滅菌的1.5mL離心管、各種規(guī)格滅菌的槍頭、離心機(最大轉速≥14000rpm)、無水乙醇、漩渦混合器等。
【檢測方法】
一、樣本前處理
動物、植物組織:將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨,離心取上清后進行樣本提取操作。
血清、血漿、體液等樣本:直接進行樣本提取操作(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補足200μL)。
二、樣本提取操作
1.取200μL處理好的樣本(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補足200μL),加入500μL裂解液,振蕩30秒,室溫靜止2分鐘。
2.把上清液轉移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質,以免阻塞吸附膜),12000rpm離心1分鐘,棄去套管中液體。
3.(可選)向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
4.向吸附柱中加入500μL 洗滌液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
5.向吸附柱中加入500μL 洗滌液,12000rpm離心2分鐘,棄去套管中液體。
6.把吸附柱轉移至新的1.5mL滅菌離心管中,室溫晾干1分鐘。
7.向吸附柱吸附膜的中央加入50μL洗脫液,室溫下靜置2分鐘。
8.12000rpm離心1分鐘,棄去吸附柱,1.5mL滅菌離心管中液體即為RNA溶液。
【注意事項】
1.如果有冷凍離心機,最好在4℃進行離心。
2.請穿戴手套,用DEPC水浸泡所有的槍頭和離心管以保證不含有RNA酶,如果條件允許,請在超凈工作臺進行。
3.使用前請檢查裂解液中是否有結晶,如果由于溫度過低導致溶液結晶,請將裂解液置于56℃溫浴,使結晶*溶解后再使用。
4.去蛋白漂洗液、洗滌液請按照說明書加入無水乙醇。
5.RNA請于4℃保存或者冰浴,立即用于下游實驗,或者立即置于-80℃冰箱保存。