大腸桿菌O抗原診斷血清說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名： 大腸桿菌O抗原診斷血清

英文名： Escherichia coli O antisera

【產(chǎn)品說明】

本套血清用于大腸桿菌O抗原的鑒定，是將大腸桿菌O抗原標(biāo)準(zhǔn)株經(jīng)過培養(yǎng)，制備成滅活抗原，免疫家兔所得。本血清產(chǎn)品已經(jīng)過吸附去除了非特異性凝集成分，具有效價高，特異性強的特點。

【規(guī)格】每種1瓶，每瓶1ml，均為使用液。

【使用方法】

1.     產(chǎn)品在使用前最好恢復(fù)溫度到室溫。

2.     由患者糞便或其他材料分離的革蘭氏陰性桿菌，經(jīng)初步生化檢查，疑似大腸桿菌時，應(yīng)先分別用各種多價血清做玻片凝集試驗，陽性反應(yīng)時，再與相應(yīng)的單價血清做玻片凝集試驗，作出診斷。在潔凈玻片上用接種環(huán)滴加兩滴彼此分離的生理鹽水。

3.     從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取分純的菌落，分別與玻片上的生理鹽水混勻。

4.     用接種環(huán)滴加1～2滴血清（10-15ul）于玻片上一個菌落與生理鹽水的混合液中，另一個菌落與生理鹽水的混合液中加入一滴生理鹽水作為對照。

5.     用接種環(huán)分別混勻玻片上的兩種混合液。

6.     輕輕搖動玻片1分鐘，觀察。于1分鐘內(nèi)呈2+及以上凝集現(xiàn)象為陽性，1分鐘內(nèi)呈現(xiàn)2+以下凝集現(xiàn)象為陰性。

7.     凝集結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：

反應(yīng)強度       判別依據(jù)

4+           反應(yīng)澄清透明，凝集顆粒較多、較大

3+           反應(yīng)澄清透明，凝集顆粒較多、較小

2+           反應(yīng)有些混濁，但仍可見較多顆粒狀凝集

1+           反應(yīng)非?；鞚?，只有少許顆粒狀凝集

-             反應(yīng)*混濁，未出現(xiàn)任何凝集

【其他所需材料】潔凈玻片、生理鹽水（0.85%的氯化鈉溶液）、接種環(huán)或移液器。。

【注意事項】 本產(chǎn)品只能作為大腸桿菌血清型判定的輔助方法，最終的判定需形態(tài)學(xué)、生化方法和血清學(xué)方法共同進行

本產(chǎn)品應(yīng)避免冷凍。反復(fù)凍融會使血清產(chǎn)生沉淀。

本產(chǎn)品在保存過程中可能會產(chǎn)生渾濁或沉淀，這并不表示該產(chǎn)品已被污染。離心或者過膜去掉渾濁或沉淀后，可以正常使用。

本產(chǎn)品含有0.3%疊氮-化鈉作為防腐劑，丟棄時需倒入下水管，并用大量的水沖洗下水管。

若待檢菌株與本產(chǎn)品均無明顯凝集現(xiàn)象，應(yīng)將可疑菌落經(jīng)2YT固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)12-16小時，用1ml生理鹽水洗下培養(yǎng)物，于121℃高壓15分鐘或水浴煮沸30分鐘，再進行血清凝集反應(yīng)。

若對照呈現(xiàn)明顯凝集現(xiàn)象，說明所檢菌株為粗糙型，應(yīng)重新選取其他菌落進行凝集反應(yīng)。

【儲藏條件】2~8℃避光保存，在標(biāo)明的有效期內(nèi)使用。

【有效期】24個月。

【參考文獻】《中國生物制品檢定規(guī)程》

Ewing.W.H. Edwards & Ewing’s Identification of Enterobacteriaceae.

Carpenter K.P. (1968) Association of Clinical Pathologists Broadsheet 60.

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