動(dòng)態(tài)軸向加壓色譜柱是一種液相色譜柱,通常用于配制純化高質(zhì)量的蛋白質(zhì),它有一個(gè)內(nèi)部壓縮塊和一個(gè)外殼。樣品經(jīng)過投入柱的頂部并保留在壓縮塊頂部,隨后緩慢地將緩沖液從頂部注入樣品區(qū)域并以恒定速率移動(dòng)。當(dāng)細(xì)胞或分子與固定于內(nèi)側(cè)表面的多功能樹脂顆粒相互作用時(shí),樣品內(nèi)的成分被分離。該產(chǎn)品通過柱底部排放而收集到樣品收集器中。
動(dòng)態(tài)軸向加壓色譜柱操作注意事項(xiàng):
1.準(zhǔn)備好所有緩沖溶液及樣品。
2.在進(jìn)行操作前,確保DAxC柱裝置已正確設(shè)置。
3.使用之前檢查內(nèi)部壓縮塊以確保其完整性。
4.如需更換DAxC柱,請(qǐng)先將其廢棄。對(duì)于使用中的柱,定期按照廠家建議進(jìn)行維護(hù)和清洗。
5.操作過程中應(yīng)注意避免空氣進(jìn)入柱內(nèi),以免影響色譜結(jié)果。
6.操作結(jié)束后應(yīng)立即關(guān)閉系統(tǒng),并將壓力釋放到零。
動(dòng)態(tài)軸向加壓色譜柱廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、制藥工業(yè)等領(lǐng)域,在蛋白質(zhì)純化中扮演著至關(guān)重要的角色。該技術(shù)在從血漿中剝離出特定蛋白質(zhì)的過程中非常有效;它也可以提供高分辨率的同分異構(gòu)體分離和產(chǎn)生高純度的單克隆抗體。此外還可用于DNA純化、海綿類毒素聚合物的混合物純化等方面,具有應(yīng)用價(jià)值。能夠有效地提取和純化蛋白質(zhì)等產(chǎn)品,使用時(shí)需要注意保持柱體內(nèi)的真空狀態(tài)、防止柱內(nèi)空氣進(jìn)入等措施。
在使用較長(zhǎng)時(shí)間后,容易出現(xiàn)零件磨損、連接結(jié)構(gòu)松動(dòng)等問題。因此,在使用完成后需要進(jìn)行定期的檢查和維修,保證所有零件都能正常工作。具體方法包括:對(duì)單元可以成對(duì)的部位進(jìn)行檢查:如小平面組、中平面組、大平面組,推彈、板夾緊、鉸鏈等情況;觀察超聲波電機(jī)的旋轉(zhuǎn),是否偏心或失速;觀察附件的坐標(biāo)值,是否偏移等;測(cè)試常規(guī)數(shù)據(jù),比如漏液測(cè)試、重復(fù)性和準(zhǔn)確性測(cè)試。
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