凱杰Ni-NTA Agarose試劑是親合層析用基質(zhì)，用于純化帶有His標(biāo)簽的重組蛋白。細(xì)胞裂解上清液上樣到純化基質(zhì)上，His-tagged蛋白結(jié)合，其他蛋白則流過基質(zhì)。洗滌后，His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。

凱杰Ni-NTA Agarose試劑的特點：

一、一步純化就可從細(xì)胞裂解液中得到純度大于95%的蛋白

二、高親和力和高結(jié)合能力

三、可以選擇在天然或變性條件下純化蛋白

四、預(yù)先加載的即用型基質(zhì)適合任何規(guī)模的蛋白純化

五、提供自動純化和檢測的方法

    QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于獲得Ni-NTA（氨基三乙酸鎳）樹脂。該技術(shù)可在天然或變性條件下，從所有表達(dá)體系中一步純化幾乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四個鎳離子螯合位點，與鎳的結(jié)合能力比其他僅有三個金屬螯合位點的金屬螯合純化方法的結(jié)合能力強(qiáng)。多出的一個螯合位點可防止鎳離子脫落，因此具有更強(qiáng)的結(jié)合能力，蛋白純度比金屬螯合純化方法的蛋白純度高。QIAexpress技術(shù)可用于從桿狀病毒、哺乳動物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌等各種表達(dá)體系中純化His-tagged蛋白。

    His-tagged蛋白的純化包括四個步驟：裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫。使用QIAexpress 技術(shù)純化重組蛋白無需依賴于蛋白的三維結(jié)構(gòu)或6xHis標(biāo)簽。因此可實現(xiàn)在天然或變性條件下，從稀釋溶液或細(xì)胞裂解液中一步純化蛋白?？墒褂脧?qiáng)變性劑和洗滌劑高效溶解和純化受體、膜蛋白和形成包涵體的蛋白。洗滌緩沖液中可包含有能高效去除非特異性結(jié)合產(chǎn)物的試劑。在溫和條件下加入100–250 mM咪唑作為競爭性洗脫試劑或降低pH值，可洗脫得到純化蛋白。