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朗格爾漢斯島的α細(xì)胞和β細(xì)胞的可視

閱讀:419      發(fā)布時(shí)間:2024-7-15
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朗格爾漢斯島的α細(xì)胞和β細(xì)胞的可視化


何謂朗格爾漢斯島(胰島)

存在于胰臟的內(nèi)分泌腺稱為朗格爾漢斯島(胰島)。
胰腺包括向十二指腸分泌淀粉酶等消化酶的外分泌細(xì)胞和分泌激素的內(nèi)分泌細(xì)胞,其中絕大部分為外分泌細(xì)胞。內(nèi)分泌細(xì)胞作為小細(xì)胞團(tuán)像島那樣散布在外分泌細(xì)胞中,根據(jù)發(fā)現(xiàn)者德國(guó)病理學(xué)家保爾·朗格爾漢斯的姓名,被命名為朗格爾漢斯島。
由朗格爾漢斯島分泌的胰島素等激素具有調(diào)整血糖值的作用,若該功能下降將導(dǎo)致糖尿病。

朗格爾漢斯島的細(xì)胞及其作用

胰臟分為胰頭、胰體、胰尾,朗格爾漢斯島多存在于胰尾。
朗格爾漢斯島包括α(A)細(xì)胞、β(B)細(xì)胞、δ(D)細(xì)胞,分別分泌不同激素,調(diào)整血液中所含的葡萄糖濃度。由此,可保持血糖值的正常狀態(tài)。

α細(xì)胞(A細(xì)胞)

α細(xì)胞分泌名為胰高血糖素的激素。胰高血糖素具有提高偏低的血糖值的作用。血糖值下降時(shí),胰高血糖素將促進(jìn)糖原的分解(糖原分解促進(jìn)作用),提高血液中的葡萄糖濃度。同時(shí)胰高血糖素促進(jìn)細(xì)胞中蓄積的葡萄糖向血液排出。由此,胰高血糖素通過(guò)提高葡萄糖濃度來(lái)提升血糖值。

β細(xì)胞(B細(xì)胞)

β細(xì)胞分泌名為胰島素的激素。胰島素具有降低偏高的血糖值的作用。血糖值上升時(shí),胰島素將促進(jìn)葡萄糖的合成(糖原合成促進(jìn)作用),降低血液中的葡萄糖濃度。通過(guò)胰島素合成的葡萄糖將轉(zhuǎn)換為糖原并作為能量蓄積,從而抑制葡萄糖向血液排出。同時(shí)胰島素還促進(jìn)細(xì)胞吸收葡萄糖。由此,胰島素通過(guò)降低葡萄糖濃度來(lái)降低血糖值。

δ細(xì)胞(D細(xì)胞)

δ細(xì)胞分泌名為生長(zhǎng)抑素的激素。生長(zhǎng)抑素通過(guò)攝取食物來(lái)分泌。除抑制胰高血糖素及胰島素分泌以外,還抑制從十二指腸分泌的膽囊收縮素及促胰液素等促進(jìn)胰液分泌的激素分泌。通過(guò)由生長(zhǎng)抑素抑制此類胰液分泌,血糖值能夠保持正常狀態(tài)。另外還抑制消化系統(tǒng)的過(guò)度運(yùn)動(dòng)及營(yíng)養(yǎng)吸收和消耗。

朗格爾漢斯島的觀察

通過(guò)抗胰高血糖素抗體與抗胰島素抗體的熒光免疫染色,可將胰高血糖素陽(yáng)性細(xì)胞作為α細(xì)胞,將胰島素陽(yáng)性細(xì)胞作為β細(xì)胞進(jìn)行可視化,明確朗格爾漢斯島內(nèi)的各細(xì)胞分布。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用程序,還可定量評(píng)價(jià)各陽(yáng)性細(xì)胞的面積或熒光強(qiáng)度。近年來(lái),作為治療糖尿病的1種方法,對(duì)從iPS細(xì)胞等人類多功能干細(xì)胞制作胰臟細(xì)胞并進(jìn)行移植的研究取得進(jìn)展,且研究表明其中由糖尿病小鼠衍生而來(lái)的移植片所具有的胰島素陽(yáng)性細(xì)胞面積率較高,在此評(píng)價(jià)過(guò)程中也使用了熒光免疫染色的定量方法。

進(jìn)行此類評(píng)價(jià)使用倍率約為4倍至20倍的物鏡,由于無(wú)法將切片整體納入視野,只能以存在朗格爾漢斯島的部位為中心進(jìn)行觀察及拍攝。但近年來(lái)對(duì)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)客觀性的要求越來(lái)越高,如何排除拍攝及分析時(shí)的隨意性*已成為研究中的難題,單純對(duì)特定部位進(jìn)行單獨(dú)觀察及拍攝的方法已無(wú)法解決這一難題。
一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800僅需確定切片外周的4點(diǎn),即可通過(guò)自動(dòng)拍攝圖像并可高精度拼接圖像的“圖像拼接功能",獲得切片整體的高精細(xì)圖像,此類難題也將迎刃而解。
在以下案例中,為使胰臟切片完整納入1張圖像內(nèi),使用Plan Apochromat4倍鏡頭,并通過(guò)圖像拼接功能進(jìn)行橫向3張×縱向5張圖像的自動(dòng)拍攝及拼接。

* 排除隨意性
隨意是指在判斷標(biāo)準(zhǔn)上沒(méi)有邏輯必然性,僅憑借即興判斷,排除隨意性就是排除這樣的隨意狀態(tài)。論文重視的是“客觀性"和“再現(xiàn)性",使用顯微鏡拍攝的圖像被認(rèn)為對(duì)這2點(diǎn)有重大影響。在切片的局部圖像中,會(huì)出現(xiàn)拍攝者隨意拍攝對(duì)自己有利的部位的案例,但是拍攝沒(méi)有接縫的高分辨率的整體像,可排除拍攝者的隨意性,獲得客觀性高的評(píng)價(jià)。

圖片1.png

使用物鏡:Plan Apochromat 4X
圖像拼接:5張 × 3張

  • 如果引進(jìn)一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800



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