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氣相色譜法測定唾液乳桿菌發(fā)酵過程中有機酸測定
有機酸普遍存在于生物樣品、食品、環(huán)境樣品以及工業(yè)化學(xué)品中，但通常樣品復(fù)雜且含量很低。色譜法是有機酸分析中zui常用的方法。用液相色譜法（紫外檢測器）測定有機酸時，易受夾雜成分的干擾，引起較大誤差；另外在測定小分子有機酸是需要較低的pH值，易引起色譜柱的流逝。氣相色譜只能分析氣態(tài)物質(zhì)和具有揮發(fā)性的有機物，一般來說，氣體和沸點及極性較低的液體，可以直接進(jìn)樣分析，但對于某些物質(zhì)，由于它們的極性很強，揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性較低，不適于直接進(jìn)樣分析，對于這類物質(zhì)，可用化學(xué)處理，將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的揮發(fā)性衍生物，在進(jìn)行色譜分析，常用簡單易行的方法有甲酯化、硅烷化等。
檢測有機酸的色譜柱通常有兩種DB-5和FFAP。使用DB-5的柱子要求有機酸必須經(jīng)過衍生化反應(yīng)，F(xiàn)FAP柱可以直接測定揮發(fā)性有機酸。利用氣相色譜測定有機酸在食品、微生物等方面有報導(dǎo)。氣相色譜測定對酸性代謝產(chǎn)物的測定也多有文章報道。
乳酸菌的應(yīng)用十分廣泛，市場上乳酸發(fā)酵支撐的產(chǎn)品，是農(nóng)業(yè)、紡織、化工、醫(yī)藥等行業(yè)的重要原料。此外還有乳酸菌飲料、酸奶、醬油等不勝枚舉。近年來，人們逐漸認(rèn)識到乳酸菌的生理功能及其對人體健康的作用，使乳酸菌在食品和醫(yī)藥等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
目前，人們對乳酸菌帶線的研究主要集中在源于丙酮酸的各種代謝路徑，如雙乙酰途徑、丙酮酸-甲酸途徑、丙酮酸-氧化酶途徑、丙酮酸脫氧酶途徑等，其中，由于雙乙酰對發(fā)酵乳品品質(zhì)其有重要影響，它賦予了很多乳制品奶油味。乳制品發(fā)酵過程中雙乙酰的生成途徑、生成條件及調(diào)控方式一直是研究人員關(guān)注的焦點。有機酸的檢測可以為代謝途徑的研究提供有力支持。唾液乳桿菌是乳酸菌的一種，具有益生功能，本文采用菌株來自功能乳品教育部北京市共建重點實驗室。
儀器準(zhǔn)備
樣品處理：
1mg/ml的富馬酸甲醇溶液，2mg/ml的丙酮酸、蘋果酸、a-酮戊二酸、草酸、草酰乙酸甲醇溶液，0.024mg/ml的乳酸甲醇溶液，4mg/ml的丁二酸、異檸檬酸甲醇溶液合相同濃度的各有機酸混合標(biāo)準(zhǔn)液
色譜條件：
進(jìn)樣方式 | 不分流 |
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進(jìn)樣口溫度 | 280℃ |
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程序升溫 | 45℃保持2min，然后以6℃/min的速率升至180℃，再以10℃/min的速率升至260℃，保持5min |
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載氣 | 氮氣，流速2.2ml/min |
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進(jìn)樣量 | 1.μg |
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檢測器溫度 | 280℃ |
