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液相色譜法測(cè)定食品中的葉酸
葉酸是一種重要的B族維生素，是體內(nèi)生化反應(yīng)中一碳單位轉(zhuǎn)移酶系的輔酶，起一碳單位傳遞體的作用，與許多重要的生化過(guò)程密切相關(guān)。葉酸缺乏會(huì)引起巨幼紅細(xì)胞性貧血、高同型半胱氨酸血癥，后者被認(rèn)為是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。孕婦缺乏葉酸是引起胎兒神經(jīng)管畸形的主要原因，且會(huì)出現(xiàn)先兆子癇，胎盤(pán)早剝發(fā)生率增高。許多研究證實(shí)了葉酸與新生兒缺陷、成年與老年心血管病、精神科疾病、胃腸功能異常、免疫學(xué)缺陷及腫瘤等具有相關(guān)性。
葉酸廣泛存在于各種動(dòng)植物食品中，但天然食物所含葉酸大部分以多谷氨酸葉酸的形式存在，且含量不高。美國(guó)1998年1月1日起已強(qiáng)制規(guī)定在某些谷物食品中強(qiáng)化葉酸，F(xiàn)DA規(guī)定1000g谷物食品（如面包、面粉、早餐谷物、大米等）強(qiáng)化1.4mg葉酸。我國(guó)已在嬰幼兒、老年食品中強(qiáng)化葉酸。但由于缺少快速檢測(cè)方法，因而一般實(shí)驗(yàn)室還未開(kāi)展葉酸含量的測(cè)定。因此，建立簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的測(cè)定各種食物尤其是嬰幼兒、孕婦強(qiáng)化食品及老年食品中的葉酸含量有重要的現(xiàn)實(shí)意義。文中用液相柱后衍生法建立一個(gè)適用于天然或強(qiáng)化食品中葉酸定量檢測(cè)的快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的方法。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡(jiǎn)介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等，實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
樣品處理：
準(zhǔn)確稱(chēng)取5-10g樣品（內(nèi)含葉酸5μg以上）于50mL容量瓶中，固體或半固體樣品用搗碎機(jī)搗碎后再稱(chēng)樣，加水溶解，混勻并用超聲波振蕩10min。
色譜條件：
流動(dòng)相 | 含體積分?jǐn)?shù)12%乙腈的50mmol/L KH2 PO4溶液 |
流速 | 1mL/min |
柱溫 | 40℃ |
激發(fā)波長(zhǎng) | 365nm |
發(fā)射波長(zhǎng) | 450nm |
測(cè)定結(jié)果：
