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紫外分光光度法測定魔芋食品中葡甘聚糖含量的研究
魔芋又名蒟蒻,是天南星科魔芋屬多年生草本植物。其主要有效成分是魔芋葡甘聚糖(KGM),它是一種的天然膳食纖維,具有防癌、防肥胖、防糖尿病、降血脂、降血糖和血膽固醇的食療功能。魔芋粉的應用范圍逐漸在擴大,同時魔芋凝膠食品也越來越受消費者的喜愛,因此魔芋凝膠食品中葡甘聚糖含量的測定尤為重要。目前,葡甘露聚糖含量的測定方法有多種,主要有費林滴定法、甘露糖腙重量法、苯酚比色法和3,5-二硝水楊酸比色法、液相色譜法和氣相色譜法等,費林滴定法、甘露糖腙重量法、苯酚比色法和3,5-二硝水楊酸比色法都是測定還原糖的總量,測得的結果比實際的大,液相法用的視察檢測器靈敏度不高,氣相色譜法單糖衍生化復雜,而目前以甘露糖為標準的紫外分光光度法也可以用來測定多糖的含量,在濃硫酸溶液中甘露糖脫水生成5-羥甲基-2-呋喃醛,在NaCl-H3BO3存在下,5-羥甲基-2-呋喃醛轉化為5-氯甲基-2-呋喃醛,5-氯甲基-2-呋喃醛的量和甘露糖的量呈線性關系。魔芋粉中葡甘聚糖含量的測定采用的是3,5-二硝基水楊酸比色法,但是在測定魔芋凝膠食品中葡甘聚糖含量的未見報道。因此,本實驗以甘露糖為標準,用紫外分光光度法測定魔芋凝膠食品中葡甘聚糖含量,并與3,5-二硝基水楊酸比色法進行比較。
儀器準備
UV1700系列 紫外可見分光光度計
UV1700PC UV Visible Spectrophotometer
簡介 : 本產(chǎn)品采用全新設計的比例監(jiān)測雙光束學系統(tǒng),具有優(yōu)良的光學性能,使用方便,是實驗室分析*的基本儀器之一。
應用領域: 各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器,應用范圍包括市政和工業(yè)廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補給水等。
樣品處理:
將魔芋凝膠食品瀝干后,放入多功能粉碎機里,用干燥燒杯取樣20g(準確至0.0001g,同時做水分),用約100mL85%乙醇洗滌多次洗滌(洗去游離的單糖和低聚糖),再用無水乙醇洗滌,放入50℃烘箱中將樣品烘干為止。將烘干的魔芋凝膠干物質轉移入250mL磨口錐形瓶,加入40mL蒸餾水及(1+1)鹽酸20mL,沸水浴回流2h.停止回流后,迅速流水冷卻。加NaOH(4mol/L)溶液中和水解液至pH值為7,加入20%乙酸鉛5mL。水解液轉移到100mL容量瓶,定容后搖勻,過濾,待用。
測定結果: