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液相色譜法的流動相脫氣方法
液相色譜法流動相在使用前必須進(jìn)行脫氣處理，以除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過程中當(dāng)流動相由色譜柱流至檢測器時，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。若在低死體積檢測池中，存在氣泡會增加基線噪聲，嚴(yán)重時會造成液相色譜儀分析靈敏度下降，而無法進(jìn)行分析。此外溶解在流動相中的氧氣，會造成熒光猝滅，影響熒光檢測器的檢測，還會導(dǎo)致樣品中某些組分被氧化或會使柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能。
常用的脫氣方法如下：
1 吹氦脫氣法
使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動相10~15min以驅(qū)除溶解的氣體。此法適用于所有的溶劑，脫氣效果較好，但在國內(nèi)因氦氣價格較貴，本法使用較少。
2 加熱回流法
此法的脫氣效果較好。
3 抽真空脫氣法
此時可使用微型真空泵，降壓至0.05-0.07MPa即可除區(qū)溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過濾機(jī)械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會引起混合溶劑組成的變化，故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合，以保證混合后的比例不變。
4 超聲波脫氣法
將欲脫氣的流動相置放于超聲波清洗器中，用超聲波振蕩10~15min。
5 在線真空脫氣法
以上幾種方法均為離線脫氣操作，其會隨著流動相存放時間的延長又會有空氣重新溶解至流動相中。現(xiàn)在使用的在線真空脫氣技術(shù)，把真空脫氣裝置串接到儲液系統(tǒng)中，并結(jié)合膜過濾器，實現(xiàn)了流動相在進(jìn)入輸液泵前的連續(xù)真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。