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HPLC基線不穩(wěn)的原因及解決辦法
液相色譜經(jīng)常會出現(xiàn)基線不穩(wěn)定,其主要原因和解決方法大致如下:
1 高壓泵的單向閥堵塞引起基線波動;解決方法:取下單向閥,用超聲波在純水中超20分鐘zui右,去除堵塞物。
2 流動相中有溶解氣體引起基線波動;解決方法:用超聲波脫氣15~30分鐘或用充氮?dú)夥椒摎?,一般可解決。
3 高壓泵密封墊損壞,造成壓力波動,引起液相色譜儀的基線不穩(wěn);解決方法:更換高壓泵密封墊。
4 液相色譜儀的高壓泵或色譜柱存在漏液點(diǎn);解決方法:查找和確定漏液的位置。
5 色譜柱因種種原因產(chǎn)生氣泡;解決方法:在檢測器的流通池的出液口加負(fù)壓調(diào)整器。
6 液相色譜儀檢測器的波長設(shè)置不合適,沒有設(shè)定在zui大吸收波長處引起基線不穩(wěn)定;解決方法:將檢測器的測試波長調(diào)整至zui大吸收波長處。
7 色譜柱沒有平衡好,有時色譜柱的平衡時間要求很長,特別是流動相調(diào)換或發(fā)生變化時,色譜柱的平衡時間需要較長,在沒有平衡前,HPLC的基線肯定不穩(wěn)定;解決方法:用中等極性的溶劑進(jìn)行沖洗,更改流動相時,在分析前用10~20倍床體積的新流動相對柱子進(jìn)行沖洗。