Ni-NTA Agarose 是一種親和層析基質,用于純化帶有 His 標簽的重組蛋白。His 標簽中的組氨酸殘基憑借高特異性和親和力,與固定鎳離子配位球中的空位結合。澄清的細胞裂解物被加載到基質上。His 標簽蛋白與基質結合,其他蛋白則穿過基質。洗滌后,在非變性或變性條件下在緩沖液中洗脫 His 標簽蛋白。
Ni-NTA Agarose 將 Ni-NTA 與 Sepharose CL-6B 支鏈耦合在一起,具有高結合能力,非特異性結合極少。這種材料具有出色的處理性能,適用于大多數(shù)規(guī)模的間歇式和柱式純化。Ni-NTA Agarose 既可單獨提供,也可作為 QIAexpress Kits 的組成部分提供,這些試劑盒是用于從大腸桿菌中高效表達和純化 His 標簽蛋白的全套試劑盒。
QIAexpress Ni-NTA 蛋白純化系統(tǒng)基于的是獲得zhuan利的 Ni-NTA(次氮基三乙酸鎳)樹脂對含有六個或更多組氨酸殘基(連續(xù)或交替)的親和標記(His 標記)的蛋白的顯著選擇性。該技術可在非變性或變性條件下,從任何表達系統(tǒng)中一步純化幾乎所有 His 標簽蛋白。NTA 有四個鎳離子螯合位點,與只有三個位點可與金屬離子相互作用的金屬螯合純化系統(tǒng)相比,NTA 與鎳的結合更緊密。額外的螯合位點可防止鎳離子浸出,與其他金屬螯合純化系統(tǒng)相比,它的結合能力更強,制備的蛋白純度更高。QIAexpress 系統(tǒng)可用于從任何表達系統(tǒng)中純化 His 標簽蛋白,包括桿狀病毒、哺乳動物細胞、酵母和細菌。
產品優(yōu)勢:
1. 從粗裂解物中一步純化出純度大于 95% 的蛋白
2. 高結合親和力和高容量
3. 非變形或變性條件下的純化選擇
4. 預充即用型基質,適用于任何規(guī)模的純化
5. 自動純化和檢測方案
產品應用:
1. Ni-NTA 基質能可靠地一步純化適用于以下任何應用的 His 標簽蛋白
2. 結構和功能研究
3. 結晶以確定三維結構
4. 蛋白間和蛋白與 DNA 之間相互作用檢測
5. 通過免疫接種產生抗體
6. 將純化規(guī)模擴大到生產規(guī)模
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