前言:
細胞在康寧Matrigel基質這種原始且可靠的細胞外基質(ECM)上表現(xiàn)出良好的性能。
近30年前,研究人員一直在尋找促進小鼠肉瘤細胞生長的方法。最終的解決方案就是:康寧Matrigel基質,其為分離自Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物,該腫瘤富含ECM蛋白,如層粘連蛋白(主要成分)、IV型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多種生長因子。
如今,這種基于ECM的天然水凝膠是使用zui廣泛的體外2D和3D細胞培養(yǎng)模型,可使您:
1、改善正常和轉化的貼壁依賴性上皮細胞以及其他類型細胞的粘附和分化。
2、更好地模擬體內(nèi)環(huán)境,適用于2D和3D細胞培養(yǎng)應用。
應用
康寧Matrigel基質可有效促進正常和轉化的貼壁依賴性上皮細胞以及其他類型細胞的粘附和分化,包括神經(jīng)元、支持細胞、雞晶狀體、血管內(nèi)皮細胞以及肝細胞。
康寧corning代理——天津益元利康生物科技有限公司
一、康寧基質膠介紹:
康寧Matrigel基質是分離自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物,該腫瘤富含細胞外基質蛋白,包括層粘連蛋白 (主要成分)、IV型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多種生長因子。
1.質量
通過小鼠抗體產(chǎn)物 (MAP) 檢測進行常規(guī)小鼠菌落病原體篩選
對包括LDEV在內(nèi)的多種病原體進行廣泛的PCR檢測,確保對生產(chǎn)過程中使用的原材料實施嚴格控制
細菌、真菌和支原體檢測均為陰性
通過Lowry方法測定蛋白濃度
通過鱟阿米巴樣細胞溶解物試驗測定內(nèi)毒素水平
在37℃下進行14天康寧Matrigel基質凝膠穩(wěn)定性測試
利用神經(jīng)軸突生長試驗測定各批次的生物活性。將雞背根神經(jīng)節(jié)接種到1.0mm厚的康寧Matrigel基質上,48小時后,在未添加神經(jīng)生長因子的情況下,神經(jīng)軸突生長試驗需呈陽性反應
2.來源
Engelbreth-Holm-Swarm小鼠腫瘤
制備和儲存 置于-20℃下保存。避免反復凍融。切勿儲存于無霜冰箱內(nèi)。冷凍保存。
二、康寧Matrigel基質膠應用領域
● 影響成年大鼠肝細胞基因表達
● 小鼠和人乳腺上皮細胞3D培養(yǎng)
● 體內(nèi)外周神經(jīng)再生
● 代謝和毒理學研究
● 腫瘤細胞侵襲試驗
● 體外和體內(nèi)血管生成研究
● 人類腫瘤在免疫抑制小鼠體內(nèi)擴增
● 人胚胎干細胞和誘導多能性干細胞 (hiPSc) 維持
● hiPS細胞的神經(jīng)元分化
三、康寧基質膠型號列表及如何選擇
?
四、常見問題解答
? Matrigel到貨需要注意什么?
首先確認是否由干冰運輸,到貨時包裝箱中干冰是否足量,查看Matrigel液面是否基本水平,以及瓶身側壁、瓶口有無Matrigel融化的痕跡,以確保運輸質量;若發(fā)現(xiàn)問題,請及時拍照記錄,并聯(lián)系經(jīng)銷商反饋。
? 如何儲存Matrigel?
收到產(chǎn)品并確認到貨情況無異常后,請將Matrigel儲存于-20℃冰箱,長期保存可置于-80℃冰箱。切勿將Matrigel儲存于自動除霜的冰箱中。在第一次融化后請分裝保存,應避免Matrigel反復凍融。
? Matrigel顏色為什么會有不一樣?
無酚紅Matrigel沒有顏色,融化后應是透明的;
含酚紅Matrigel顏色可以在明黃色至暗紅色之間變化,這些顏色變化是正?,F(xiàn)象。因為酚紅存在時,在溫度、pH不同的情況下液體會出現(xiàn)顏色的差異。
? 如何分裝Matrigel?
建議根據(jù)您一次的使用量做小量分裝,。請注意與Matrigel接觸的所有耗材如槍頭、管子均需事先預冷,且在冰上無菌操作。分裝后的Matrigel可保存在-20℃或-80℃冰箱。建議保留瓶子的標簽或記錄下貨號(Catalog Number)及批次號(LOT number),以便后續(xù)查詢追蹤相關信息。
? Matrigel融化時發(fā)現(xiàn)有凝膠,融化不了是怎么回事?
Matrigel對溫度非常敏感,超過10℃即開始成膠,超過22℃成膠速度會更快。如果到貨情況正常,出現(xiàn)此種現(xiàn)象應該是融化操作不規(guī)范或者融化期間環(huán)境溫度升高導致部分凝膠。請一定嚴格按照融化操作規(guī)范執(zhí)行,確保融化時保持低溫環(huán)境。
? 如何稀釋Matrigel?
一般可用預冷的無血清培養(yǎng)基或pH7.4的PBS稀釋。由于批次之間的濃度差異,除354277外,推薦按照特定的工作終濃度稀釋,而不要以比例或稀釋倍數(shù)稀釋。
? Matrigel使用濃度?
凝膠濃度:在需要Matrigel凝膠的實驗中,工作濃度需大于3 mg/mL
包被濃度:包被實驗時Matrigel無需成膠,因此包被濃度應小于凝膠濃度(即3mg/mL)
工作濃度需要根據(jù)具體的細胞類型進行預實驗測試。對于侵襲實驗,建議初始濃度設置在200-300 μg/mL之間,再根據(jù)特定的實驗體系進行優(yōu)化
血管生成實驗濃度:請務必使用大于10 mg/mL的Matrigel產(chǎn)品,康寧提供挑選批次和批次預留的服務,請您在訂購產(chǎn)品時向代理商說明您的要求
體內(nèi)皮下注射實驗濃度:由于是體內(nèi)實驗,為了避免成膠不wan全,建議終濃度在4 mg/mL以上。
? 使用Matrigel時需要注意哪些方面?
所有接觸Matrigel的試劑耗材產(chǎn)品都需要預冷,操作過程應全程在冰上操作,確保低溫環(huán)境。Matrigel對溫度十分敏感,一旦超過10℃,即開始凝膠。以下圖片可供參考:
? 如何區(qū)別包被和凝膠?
包被指Matrigel濃度小于成膠濃度(即<3 mg/mL),在細胞培養(yǎng)器皿表面形成薄薄的蛋白層而不凝成膠凍狀物質;凝膠指Matrigel濃度大于等于成膠濃度(即≥3 mg/mL),在細胞培養(yǎng)器皿表面能夠形成膠凍狀物質。
康寧基質膠代理——天津益元利康生物科技有限公司,為您提供康寧Corning耗材。如移液槍、錐形瓶、48孔板、Matrige基底膜基質等實驗耗材,更多產(chǎn)品,歡迎咨詢!
立即詢價
您提交后,專屬客服將第一時間為您服務