Moltox菌株特點(diǎn)

　　一、Moltox菌株的核心特點(diǎn)與原理
 

　　這些菌株經(jīng)過精心設(shè)計(jì)，具有以下共同特征，使其能夠靈敏地檢測出遺傳毒性物質(zhì)：
 

　　1.  組氨酸營養(yǎng)缺陷型(His?)：
 

　　這是Ames試驗(yàn)的基礎(chǔ)。這些菌株自身不能合成組氨酸(一種必需氨基酸)，因此在沒有組氨酸的培養(yǎng)基上無法生長形成菌落。
 

　　回復(fù)突變：如果受試化合物能引起DNA突變，使菌株恢復(fù)合成組氨酸的能力(His? → His?)，這些回復(fù)突變菌就能在無組氨酸的培養(yǎng)基上生長形成可見的菌落。菌落數(shù)目的多少與化合物的致突變性強(qiáng)弱成正比。
 

　　2.  細(xì)胞壁通透性增強(qiáng)(rfa突變)：
 

　　菌株攜帶`rfa`突變，導(dǎo)致其細(xì)胞壁外層的脂多糖(LPS)屏障不完整，使得大分子化合物(如苯并芘等多環(huán)芳烴)更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，提高了檢測靈敏度。
 

　　3.  DNA修復(fù)系統(tǒng)缺陷(ΔuvrB)：
 

　　菌株缺失了`uvrB`基因，導(dǎo)致其切除修復(fù)系統(tǒng)功能喪失。這使得DNA損傷難以被正確修復(fù)，突變更容易被固定和積累，進(jìn)一步增強(qiáng)了檢測的敏感性。
 

　　4.  攜帶R因子質(zhì)粒(pKM101)：
 

　　許多Moltox菌株(如TA98, TA100)體內(nèi)含有一個(gè)名為pKM101的質(zhì)粒。
 

　　該質(zhì)粒能增強(qiáng)細(xì)胞的SOS應(yīng)急修復(fù)反應(yīng)(一種容易出錯(cuò)的修復(fù)方式)，從而提高對許多致突變劑的敏感性。
 

　　二、常見的Moltox菌株及其特性
 

　　以下是一些常用、具代表性的Moltox菌株：

 

　　三、Moltox菌株如何使用：
 

　　Ames試驗(yàn)流程簡述
 

　　1.  準(zhǔn)備菌株：復(fù)蘇并培養(yǎng)Moltox菌株。
 

　　2.  制備受試物：將待測化合物溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲小?br /> 

　　3.  混合與誘導(dǎo)：將菌液、受試物以及S9代謝活化系統(tǒng)(模擬哺乳動物肝臟代謝功能，用于檢測前致癌物)在頂層瓊脂中混合。
 

　　4.  鋪板：將混合物倒入葡萄糖瓊脂平板(無組氨酸)上。
 

　　5.  培養(yǎng)：在37°C下培養(yǎng)48-72小時(shí)。
 

　　6.  計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)每板上回變菌落的數(shù)量。
 

　　7.  結(jié)果判定：如果 test substance 組的回變菌落數(shù)是陰性對照組的兩倍或以上，并具有劑量-反應(yīng)關(guān)系，則判定為陽性結(jié)果(具有致突變性)。
 

　　—— 總結(jié)
 

　　Moltox菌株是Ames試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化、商業(yè)化工具。
 

　　它們通過多重遺傳修飾(組氨酸缺陷、細(xì)胞壁通透性增加、DNA修復(fù)缺陷、攜帶R因子)來檢測遺傳毒性的敏感性。
 

　　不同菌株檢測不同類別的突變(移碼突變 vs. 堿基置換)，因此在實(shí)踐中通常需要一組菌株(如TA98, TA100, TA1535, TA97, TA102)來全面評估化合物的致突變潛力。
 

　　這些菌株為全球的遺傳毒理學(xué)研究和風(fēng)險(xiǎn)評估提供了至關(guān)重要、不可替代的工具。
 

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