百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒

一、產(chǎn)品簡介

 百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒，本產(chǎn)品適用于蛾腸道組織細(xì)胞懸液的分離制備，本產(chǎn)品利用酶溫和、快速有效地破壞細(xì)胞外 基質(zhì)，釋放細(xì)胞，從而生成單細(xì)胞懸浮液。制備的單細(xì)胞懸液可用于細(xì)胞分選、細(xì)胞培養(yǎng)或 其他細(xì)胞相關(guān)檢測。 

保存條件-20℃保存，有效期兩年。 

二、注意事項(xiàng) 

1.  離心機(jī)務(wù)必使用水平離心機(jī)，并設(shè)置合適的參數(shù)，避免因操作不當(dāng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2. 本產(chǎn)品為無菌產(chǎn)品，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套，注意無菌操作，避免微生物污染。

 3. 使用前需確保試劑wanquan融化并混勻。 4. 昆蟲細(xì)胞較脆弱，顛倒及吹打操作應(yīng)輕柔，吸取及吹打細(xì)胞盡量使用擴(kuò)口槍頭。 自備材料 1. 儀器：水浴鍋（定時手動搖晃混勻）或雜交爐（轉(zhuǎn)速20~30轉(zhuǎn)/分鐘）、水平離心機(jī)。 2. 試劑：D-Hanks 緩沖液（不含鈣鎂）、FBS。 3. 耗材：低吸附槍頭、5mL和15mL離心管、40μm細(xì)胞篩。

 4. 消化：具體消化時間根據(jù)物種與組織量不同靈活調(diào)整。 

三、使用方法

 準(zhǔn)備工作：水浴鍋或雜交爐設(shè)置到28℃、配制含4%FBS的D-Hanks。 切取10~15只新鮮蛾腸道組織。 

取一個5mL離心管，加入3mL蛾腸道組織解離液。

將組織樣本用4%FBS的D-Hanks清洗干凈，在少量（約40µL）蛾腸道組織解離液中充 分剪碎，并轉(zhuǎn)移到第1步準(zhǔn)備好的溶液中，顛倒混勻。

放在28℃水浴鍋或雜交爐中消化25~35min。消化過程中，使用水浴鍋每隔3~5min 手動吹打搖晃混勻，使用雜交爐轉(zhuǎn)速20~30轉(zhuǎn)/分鐘左右。

每隔5min質(zhì)檢一次細(xì)胞懸液，根據(jù)細(xì)胞總量及活性等確定消化終止時間。

消化完成后，用40μm細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液，收集濾液于15mL離心管中。

使用6mL4%FBS的D-Hanks涮洗消化管管壁，涮洗液經(jīng)過同一個40μm細(xì)胞篩進(jìn)行過 濾，收集濾液于第5步的15mL離心管中，共9mL。

將收集液于4℃，300×g離心5min，棄上清。

用50µL~1mL4%FBS的D-Hanks重懸沉淀，根據(jù)所需的細(xì)胞濃度調(diào)整重懸液的體積。

（可選擇步驟）可再加入4mL4%FBS的D-Hanks并混勻，4℃，300×g離心5min，棄 上清，加入適當(dāng)體積4%FBS的D-Hanks重懸沉淀（細(xì)胞數(shù)會有損失）。

百奧益康蛾腸道組織解離試劑盒——天津益元利康生物科技有限公司

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