產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
PEI線(xiàn)性轉(zhuǎn)染試劑是以一種陽(yáng)離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合，并賦予凈陽(yáng)離子電荷，使DNA進(jìn)入細(xì)胞。
應(yīng)用范圍：能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系，包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：低毒，高效；操作簡(jiǎn)單，高性?xún)r(jià)比；具有可重復(fù)性的轉(zhuǎn)染結(jié)果；適用于快速、高通量轉(zhuǎn)染流程轉(zhuǎn)染步驟:

-以HEK293貼壁細(xì)胞為例，步驟如下：

1. 細(xì)胞接種：細(xì)胞密度2-6 x10⁶ cells/mL.

2. 質(zhì)粒的準(zhǔn)備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每10 ⁶個(gè)細(xì)胞稀釋1.0 ug pDNA。

3. PEI的準(zhǔn)備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每10 ⁶個(gè)細(xì)胞稀釋3.0 ug PEI Prime，混勻

4. 通過(guò)快速，短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管，將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

6. 一邊旋轉(zhuǎn)板，一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細(xì)胞中。

7. 于37℃ CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

轉(zhuǎn)染的優(yōu)化：

為達(dá)到高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性的良好結(jié)果，可以進(jìn)行如下優(yōu)化：