血漿、尿液、唾液和細(xì)胞的收集和處理方法

上?？撇┤鹕锟萍加邢薰靖嬷?、血漿、尿液、唾液和細(xì)胞的收集和處理方法：

1. 血清：用無(wú)菌管收集，室溫血液天然凝聚10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

4. 唾液：用無(wú)菌管收集，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

培育的細(xì)胞    

1. 動(dòng)物細(xì)胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液，使細(xì)胞濃度到達(dá)100萬(wàn)/ml左右。經(jīng)過(guò)重復(fù)凍融(假如重復(fù)凍融，破碎效果欠好，就選用超聲波破碎)，以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

2. 植物細(xì)胞：用PH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液，使細(xì)胞濃度到達(dá)100萬(wàn)/ml左右，置于冰盒上，用超聲破碎儀，設(shè)置破碎2s，冷卻30s的方法，充分破碎細(xì)胞，以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

組織的細(xì)胞    

1. 切割標(biāo)本后，稱取1g組織，參加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗刷堆積的細(xì)胞三遍。再用上述的細(xì)胞破碎方法破碎細(xì)胞。

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