一種檢測miRNA的方法和試劑盒

碧芯生物技術(shù)聯(lián)合海南醫(yī)學(xué)院共同開發(fā)miRNA高通量檢測試劑盒。申請(qǐng)?zhí)枺?02211310795.4   本申請(qǐng)公開了一種檢測miRNA的方法和試劑盒。本申請(qǐng)方法包括對(duì)待測RNA樣本進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，生成cDNA；采用針對(duì)miRNA設(shè)計(jì)的鎖式探針，以cDNA為模板進(jìn)行成環(huán)反應(yīng)，將鎖式探針連接成環(huán)；采用針對(duì)鎖式探針設(shè)計(jì)的延伸引物，對(duì)成環(huán)產(chǎn)物進(jìn)行滾環(huán)擴(kuò)增；第一延伸引物5’端連接編碼微球，滾環(huán)擴(kuò)增時(shí)采用熒光標(biāo)記dUTP替代 dTTP；滾環(huán)擴(kuò)增后，檢測熒光信號(hào)，確定待測RNA樣本的miRNA信息。本申請(qǐng)檢測miRNA的方法和試劑盒，利用鎖式探針和滾環(huán)擴(kuò)增，能對(duì)多個(gè)miRNA靶標(biāo)進(jìn)行檢測，為miRNA檢測提供了一種新的高通量、低成本的高性價(jià)比的檢測方法，對(duì)篩查與疾病相關(guān)的一些特異性miRNA具有重要意義。