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環(huán)丙沙星檢測(cè)試劑盒概要
環(huán)丙沙星是一種喹諾酮類抗菌藥,因其具有廣譜抗菌活性和很強(qiáng)的組織穿透能力,因而成為畜禽和水產(chǎn)的專用喹諾酮類抗菌藥物,被大量用于治療、預(yù)防和促進(jìn)生長(zhǎng)。但由于其耐藥性和潛在的致癌性,歐盟、日本及我國均制定了在組織中的最高殘留限量。
環(huán)丙沙星檢測(cè)試劑盒采用ELISA檢測(cè)方法,快速便捷即能檢測(cè)出樣本環(huán)丙沙星的藥殘留量,其方法能最大限度減少操作失誤和工作的強(qiáng)度。
二、環(huán)丙沙星檢測(cè)試劑盒原理
環(huán)丙沙星試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)蜂蜜、動(dòng)物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)、牛奶、奶粉和雞蛋等樣本中的環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin,CPFX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的環(huán)丙沙星和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗環(huán)丙沙星抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含環(huán)丙沙星含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中環(huán)丙沙星的殘留量。
三、適用范圍
環(huán)丙沙星試劑盒可定性、定量檢測(cè)動(dòng)物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)蜂蜜樣本中環(huán)丙沙星的殘留量。
四、 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,45min~15min。
2.3 檢測(cè)下限:
組織:0.3ppb 蜂蜜:0.4ppb 牛奶:3ppb 奶粉:6ppb 雞蛋:3ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
環(huán)丙沙星:100% 左氧氟沙星:10% 諾氟沙星:3% 沙拉沙星:2%
其它沙星類藥物交叉反應(yīng)率均小于0.1%
2.5 樣本回收率:
組織:85%±15% 蜂蜜:85%±15% 牛奶:85%±15% 奶粉:85%±15% 雞蛋:85%±15%
五、環(huán)丙沙星快速檢測(cè)盒組成
酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)液(6個(gè))、高標(biāo)準(zhǔn)液、酶標(biāo)記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復(fù)溶液
六、貯藏條件及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。
樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:0.15M鹽酸溶液
取5ml濃鹽酸,加入去離子水混勻,定容至400ml。
配液2:樣本提取液
量取10ml 0.15M鹽酸溶液(配液1)加入到90ml無水乙腈中混合均勻。
配液3:復(fù)溶液
將5×復(fù)溶液用去離子水5倍稀釋(1份5×復(fù)溶液加4份去離子水),用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月。
配液4:工作洗滌液
將20×濃縮洗滌液20倍稀釋(1份20×濃縮洗滌液加19份去離子水)。
樣本前處理步驟:
5.3.1 動(dòng)物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)處理方法
1)稱取2g±0.05g均質(zhì)過的組織樣本于50ml離心管中;
2)加入8ml樣本提取液(配液2),振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
3)取2ml清澈上層有機(jī)相至潔凈干燥的10ml玻璃試管中,50-60℃水浴氮?dú)獯蹈桑?/p>
4)加入1ml正己烷,振蕩2分鐘,再加1ml復(fù)溶液(配液3),振蕩30秒,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘;
5)去除上層正己烷,取下層水相50µl液體用于分析。