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訪問次數(shù):131更新時(shí)間:2023-06-08 11:37:37
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一、甲氧芐氨嘧啶快速檢測試劑盒簡介
甲氧芐氨嘧啶檢測試劑盒是用于魚、蝦、肉類(雞肉、牛肉和豬肉),飼料,血清,尿液等中甲氧芐氨嘧啶殘留的定量檢測。甲氧芐氨嘧啶作為獸藥 用于尿路感染的預(yù)防和治療。根據(jù)EEC No.2377/90規(guī)定,在肌肉,肝臟和牛奶中甲氧 芐氨嘧啶藥物的含量不能超過50 ng/g (ppb)。
與傳統(tǒng)的HPLC 或GC-MS 方法相比,酶聯(lián)免疫方法有操作簡便、靈敏度高、成 本低的優(yōu)點(diǎn)。甲氧芐氨嘧啶酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒為養(yǎng)殖者和政府監(jiān)督管理部門
提供了更準(zhǔn)確快速檢測甲氧芐氨嘧啶殘留的方法,這包括:
? 該試劑盒的提取方法將達(dá)到80%以上的回收率。
? 高靈敏度(0.015ppb)。
? 檢測過程只需要不到2小時(shí)。
? 高重復(fù)性。
二、甲氧芐氨嘧啶酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒原理
甲氧芐氨嘧啶酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理,含有甲氧芐氨嘧啶的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時(shí),樣品同甲氧芐氨嘧啶抗原共同被添加到板孔中。如果樣品中含有藥物,會競爭結(jié)合板上包被的抗體,酶標(biāo)抗原與板上包被的抗體結(jié)合。加入底物后,產(chǎn)物的顏色強(qiáng)弱與樣品中藥物的濃度成反比。
三、適用范圍
甲氧芐氨嘧啶快速檢測試劑盒可定性、定量檢測動(dòng)物組織(肌肉/魚/蝦)、雞蛋、飼料等樣品中甲氧芐氨嘧啶藥物的殘留量。
四、技術(shù)指標(biāo)
1 試劑盒靈敏度:0.015ppb(ng/ml)
2 反應(yīng)模式:25℃,45min~15min。
3 檢測下限:
飼料:0.8ppb 魚/蝦/肉/肝臟/腎臟:0.2ppb 血清/尿液/血漿:0.2ppb
4 交叉反應(yīng)率:
甲氧芐氨嘧啶 :100% 磺胺吡啶≤0.1% 磺胺≤0.1% 磺胺嘧啶≤0.1% 磺胺惡唑≤0.1% 磺胺異噁唑≤0.1% 磺胺噻唑≤0.1% 磺胺甲基嘧啶≤0.1% Sulfaquanidine≤0.1% 磺胺多辛≤0.1%
5 樣本回收率:80%以上
五、甲氧芐氨嘧啶檢測試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液(黑蓋):各1ml
0ppb、0.03ppb、0.09ppb、0.27ppb、0.81ppb、2.43ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液:100ppb……………………1ml
酶標(biāo)抗原工作液(紅蓋)……………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
2×復(fù)溶液……………………………50ml
20X濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
說明書…………………………………1份
蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個(gè)
六、貯藏條件及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1 編 號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)抗原工作液50µl/孔,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,37℃反應(yīng)45分鐘。
3 洗 滌:小心揭開蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干(用吸水紙拍干,拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過淺,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。
5 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
注意事項(xiàng)
1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3 混合要均勻,洗板要徹di,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性。
4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。