特超敏 ECL 發(fā)光液

MCE 國際站：Ultra High Sensitivity ECL Kit

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件：4℃ 一年避光保存

簡介：Ultra High Sensitivity ECL Kit 是基于魯米諾底物的化學(xué)發(fā)光試劑盒，用于檢測辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。

概述：MCE 特超敏 ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒 (Ultra High Sensitive ECL Kit) 應(yīng)用檢測辣根過氧化物酶 (HRP) 標(biāo)記的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。HRP 標(biāo)記的抗體直接或間接結(jié)合膜上的目的蛋白，在洗膜后加入本試劑盒配制的 ECL 工作液，即可由 HRP 催化發(fā)出熒光。結(jié)果可以通過 X 光膠片壓片或者其他熒光成像設(shè)備進行檢測。本產(chǎn)品配方，靈敏度較高，對抗原的低檢測限可達中飛克級別，在western blot 實驗中，一抗 (1 mg/mL) 儲存液可稀釋1:1000 至1:50000 倍，二抗 (1 mg/mL) 儲存液可稀釋 1:50000 至 1:200000 倍。持久的發(fā)光信號，較高的信噪比，保證了最佳的檢測效果。

描述：

MCE 超高靈敏度 ECL 試劑盒通過在 HRP 和過氧化物存在下氧化魯米諾，能夠檢測飛克范圍內(nèi)的抗原。該反應(yīng)產(chǎn)生長時間的化學(xué)發(fā)光，可在 X 射線膠片或數(shù)字成像系統(tǒng)上進行可視化。MCE 超高靈敏度 ECL 試劑盒產(chǎn)生強而持久的信號，再加上非常低的背景水平，允許長時間曝光，從而能夠檢測低豐度蛋白質(zhì)。

操作說明：1. 進行常規(guī) Western Blot 操作：電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、HRP 標(biāo)記抗體孵育、洗膜。2. 配制 ECL 工作液：按等體積比例混合適量 A 液和 B 液，室溫放置備用。工作液最好在臨近使用前配制。3. Western 二抗孵育后，進行數(shù)次洗滌，用平頭鑷子將印跡膜取出，瀝干膜上的洗膜液，將結(jié)合有蛋白的一面朝上，放置于潔凈保鮮膜上。4. 根據(jù)印跡膜的大小，按 0.1 mL 工作液/cm2 膜的比例滴加 ECL 工作液到膜上，確保工作液均勻覆蓋在整張印跡膜上，室溫孵育 1-2 分鐘。5. 棄去印跡膜上的 ECL 工作液，用吸水紙略吸去過多的液體。將印跡膜放在兩片保鮮膜中間，隨后進行壓片檢測或熒光成像儀檢測。6. 壓片檢測：將印跡膜固定于片夾內(nèi)。暗室內(nèi)壓片 1 分鐘，立即顯影定影，根據(jù)結(jié)果再調(diào)整壓片時間?；蛑苯訅浩?30 秒、1、3、5 分鐘，然后一起顯影定影觀察結(jié)果。7. 熒光成像儀檢測：將印跡膜放置到熒光成像儀內(nèi)，參考儀器說明書進行檢測。

注意事項：1. 本試劑盒靈敏度高，需要優(yōu)化好上樣量、一抗、二抗?jié)舛群拖♂屢?、印跡膜及封閉試劑的使用量，并按照蛋白表達豐度，參考推薦的抗體稀釋比例，來獲得最佳實驗結(jié)果。2. 如果印跡膜上條帶過亮而影響檢測結(jié)果時，可提高一抗或二抗的稀釋比例；如果條帶過暗也可將二抗稀釋比例降低至 1:5000 至 1:10000，以達到最佳效果。3. 本試劑盒熒光持續(xù)時間長，但開始反應(yīng)后的 20-30 分鐘內(nèi)熒光更強一些，隨后熒光強度會逐漸減弱，因此需充分利用熒光較強的前 30 分鐘進行壓片，或在 2 小時內(nèi)完成實驗。4. A 液和 B 液在吸取過程中必須要更換槍頭，A 液和 B 液相互污染后會導(dǎo)致 A 液或 B 液逐漸失效，影響后續(xù)的使用效果。5. 實驗室常見照明不會損害 ECL 工作液，但曝露于日光或強光下時間過久靈敏度會降低，移至暗室操作即可。6. 疊氮鈉 (NaN3) 能抑制 HRP 活性，孵育二抗后，洗膜緩沖液應(yīng)避免使用NaN3。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。8. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品：Magnolol  | Bezafibrate  | Sonidegib  | Prednisolone  | Lotiglipron  | D-α-Hydroxyglutaric acid (disodium)  | GSK-J1  | NAT  | Formoterol fumarate  | Raloxifene (hydrochloride)

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