細(xì)胞上清外泌體提取純化試劑盒

MCE 國(guó)際站：Exosome Isolation and Purification Kit (from cell culture media)

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件：室溫保存兩年

簡(jiǎn)介：MCE 細(xì)胞上清外泌體提取純化試劑盒使用的分離技術(shù)，可快速高效地從細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化外泌體，且獲得的外泌體純度和活性較高，可用于電鏡分析、NTA 粒徑分析、Western Blot、qPCR 等。

概述：外泌體 (Exosome) 是由細(xì)胞分泌的包含 RNA 和蛋白質(zhì)的小囊泡 (30-150 nm)，廣泛存在于血液、唾液、尿液及乳汁等體液中。外泌體具有細(xì)胞信使功能，參與細(xì)胞通訊。MCE 細(xì)胞上清外泌體提取純化試劑盒使用的分離技術(shù)，可快速高效地從細(xì)胞培養(yǎng)上清中分離純化外泌體，且獲得的外泌體純度和活性較高，可用于電鏡分析、 NTA 粒徑分析、 Western Blot 、 qPCR 等

描述：

外泌體是含有 RNA 和蛋白質(zhì)的小囊泡（30-150 納米），由各種類型的培養(yǎng)細(xì)胞分泌，在血液、唾液、尿液和母乳等體液中大量存在。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間信使，在特定細(xì)胞之間運(yùn)送效應(yīng)物或信號(hào)大分子。

MCE 外泌體分離純化試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單有效的方法，可以從細(xì)胞培養(yǎng)基中分離和純化完整的外泌體，可用于電子顯微鏡分析、NTA 分析、WB、qPCR 等。本產(chǎn)品含有足夠的試劑，可處理 400 mL 細(xì)胞培養(yǎng)基。

操作說(shuō)明：樣品預(yù)處理1. 若是凍存樣品，25℃ 水浴解凍后置于冰上備用；若是新鮮樣品，直接置于冰上備用。2. 取 20 mL 細(xì)胞培養(yǎng)上清液，4℃，3,000 g 離心 10 min，收集上清。注：若沉淀較多，可對(duì)收集到的上清進(jìn)一步離心，直至無(wú)明顯沉淀。外泌體提取1. 每 20 mL 離心上清液中加入 5 mL Exosome Concentration Solution (ECS)。注：使用前請(qǐng)充分混勻 Exosome Concentration Solution。2. 漩渦振蕩混勻 1 min， 4℃ 靜置 2 h 以上。注：靜置時(shí)間越長(zhǎng)，外泌體得率越高；但靜置時(shí)間不可超過(guò) 24 h。3. 4℃ ，10,000 g 離心 60 min ，棄去上清，保留沉淀。此時(shí)沉淀中含外泌體。注：此時(shí)的沉淀可能不易觀察，可在離心前標(biāo)記沉淀位置。4. 每 20 mL 細(xì)胞培養(yǎng)上清液離心獲得的沉淀中加入 0.2 mL 1× PBS，充分重懸后 4℃，12,000 g 離心 2 min，收集上清，即得外泌體粗品。注：若沉淀較多，可對(duì)收集到的上清進(jìn)一步離心，直至無(wú)明顯沉淀。外泌體純化與保存1. 將收集得到的外泌體粗品轉(zhuǎn)移至 Exosome Purification Filter (EPF 柱) 上室中，4℃，3,000 g 離心 10 min，收集 EPF 柱管底液體，即得純化的外泌體。2. 將純化的外泌體分裝后于 -80℃ 保存?zhèn)溆?，避免反?fù)凍融。

注意事項(xiàng)：1. 本試劑盒中產(chǎn)品均無(wú) RNase 及 DNase，實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)避免引入 RNase 及DNase 污染。2. 為了確保獲得的外泌體來(lái)源于您的細(xì)胞，請(qǐng)使用無(wú)外泌體的血清對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。3. 建議使用新鮮制備的樣本，避免反復(fù)凍融。4. 若后期需要將獲得的外泌體與細(xì)胞共培養(yǎng)，可用 0.22 μm 濾膜過(guò)濾除菌。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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