BstB I
MCE 國(guó)際站:BstB I
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件: -20°C 兩年
簡(jiǎn)介:BstB I 是經(jīng)過(guò)基因工程重組的快速限制性?xún)?nèi)切酶,適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。BstB I 的同裂酶有:Asu II,Bpu14 I,Bsp119 I,BspT104 I,Nsp V,Sfu I。
概述:BstB I 是經(jīng)過(guò)基因工程重組的快速限制性?xún)?nèi)切酶,適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。BstB I 的同裂酶有:Asu II,Bpu14 I,Bsp119 I,BspT104 I,Nsp V,Sfu I。本產(chǎn)品含通用的 Buffer 和 Color Buffer,其中 Color Buffer 含紅色和黃色示蹤染料,酶切產(chǎn)物可直接用于凝膠電泳。Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與 10 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。
描述:
• BstB I 在 10× 緩沖液 和 10× 顯色緩沖液 中 100% 活躍。10× 顯色緩沖液包含密度試劑以及紅色和黃色示蹤染料,可將反應(yīng)混合物直接加載到凝膠上。在 1% 瓊脂糖凝膠中,Color Buffer 的紅色染料會(huì)隨 2500 bp DNA 片段一起遷移,而在 1% 瓊脂糖凝膠中,Color Buffer 的黃色染料比 10 bp DNA 片段的遷移速度更快。
• 切割位點(diǎn)
5'…T T▼C G A A…3'
3'…A A G C▲T T…5'
操作說(shuō)明:1. DNA 快速酶切流程1.1 在冰上配制反應(yīng)體系注:若底物 DNA 為 PCR 產(chǎn)物,建議使用經(jīng)純化的 PCR 產(chǎn)物。若使用未經(jīng)純化的 PCR 產(chǎn)物,可將 10× Buffer 或 10× Color Buffer 減少至 2 μL。1.2 輕輕吸打或輕彈管壁混勻反應(yīng)液。切勿渦旋。瞬時(shí)離心收集掛壁液滴。1.3 對(duì)于質(zhì)粒 DNA,37°C 孵育 15 min;對(duì)于 PCR 產(chǎn)物,37°C 孵育 15~30 min;對(duì)于基因組 DNA,37°C 孵育 30~60 min。1.4 (可選步驟)80°C 孵育 20 min 可使酶失活,停止反應(yīng)。1.5 若使用 10× Color Buffer,酶切產(chǎn)物可以直接進(jìn)行上樣電泳。2. 適用于質(zhì)粒 DNA 的擴(kuò)大反應(yīng)體系注:若總反應(yīng)體系大于 20 μL,可適當(dāng)增加孵育時(shí)間,盡量使用水浴、金屬浴或沙浴。
注意事項(xiàng):1. 若進(jìn)行雙酶切或多酶切,每種快速內(nèi)切酶的用量為 1 μL,且所有內(nèi)切酶的體積總和不得超過(guò)總反應(yīng)體系的 1/10。可根據(jù)需要適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體系。2. 若同時(shí)使用的幾種快速內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度不同,則應(yīng)先以最適溫度低的酶開(kāi)始酶切,再添加最適溫度較高的酶,并在其最適反應(yīng)溫度下進(jìn)行酶切。3. 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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