Dpn II
MCE 國際站:Dpn II
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件: -20°C 兩年
簡介:Dpn II 是經過基因工程重組的快速限制性內切酶,適用于質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。Dpn II 的同裂酶有:Mbo I,Sau3A I,Bsp143 I,BstMB I,Nde II,BstKT I。
概述:Dpn II 是經過基因工程重組的快速限制性內切酶,適用于質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。Dpn II 的同裂酶有:Mbo I,Sau3A I,Bsp143 I,BstMB I,Nde II,BstKT I。本產品含通用的 Buffer 和 Color Buffer,其中 Color Buffer 含紅色和黃色示蹤染料,酶切產物可直接用于凝膠電泳。Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與 10 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。
描述:
• Dpn II 在 10× 緩沖液 和 10× 顯色緩沖液 中 100% 活躍。10× 顯色緩沖液包含密度試劑以及紅色和黃色示蹤染料,可直接將反應混合物加載到凝膠上。顯色緩沖液的紅色染料與 1% 瓊脂糖凝膠中的 2500 bp DNA 片段一起遷移,而顯色緩沖液的黃色染料比 1% 瓊脂糖凝膠中的 10 bp DNA 片段遷移得更快。
• 切割位點:
5'…▼GATC…3'
3'… CTA G▲…5'
操作說明:1. DNA 快速酶切流程1.1 在冰上配制反應體系注:若底物 DNA 為 PCR 產物,建議使用經純化的 PCR 產物。若使用未經純化的 PCR 產物,可將 10× Buffer 或 10× Color Buffer 減少至 2 μL。1.2 輕輕吸打或輕彈管壁混勻反應液。切勿渦旋。瞬時離心收集掛壁液滴。1.3 對于質粒 DNA,37°C 孵育 15 min;對于 PCR 產物,37°C 孵育 15~30 min;對于基因組 DNA,37°C 孵育 30~60 min。1.4 (可選步驟)80°C 孵育 20 min 可使酶失活,停止反應。1.5 若使用 10× Color Buffer,酶切產物可以直接進行上樣電泳。2. 適用于質粒 DNA 的擴大反應體系注:若總反應體系大于 20 μL,可適當增加孵育時間,盡量使用水浴、金屬浴或沙浴。
注意事項:1. 若進行雙酶切或多酶切,每種快速內切酶的用量為 1 μL,且所有內切酶的體積總和不得超過總反應體系的 1/10??筛鶕?jù)需要適當擴大反應體系。2. 若同時使用的幾種快速內切酶的最適反應溫度不同,則應先以最適溫度低的酶開始酶切,再添加最適溫度較高的酶,并在其最適反應溫度下進行酶切。3. 本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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