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Reverse Transcriptase | Reverse Transcriptase | MedChemExpress (MCE)

閱讀:62      發(fā)布時(shí)間:2024-10-8
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Reverse Transcriptase

MCE 國(guó)際站:Reverse Transcriptase

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件: -20°C,1 年

簡(jiǎn)介:Reverse Transcriptase是通過(guò)基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶。

概述:Reverse Transcriptase是通過(guò)基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下幾種活性:1)依賴于RNA的DNA聚合酶活性;2)依賴于DNA的DNA聚合酶活性;3)RNase H活性。由于RNase H能夠催化降解DNA/RNA雜合體中的RNA,因此在cDNA第一條鏈的合成反應(yīng)中可能會(huì)降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的RNase H活性缺失,延伸能力強(qiáng),可用于較長(zhǎng)的cDNA合成,高比例的全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建以及Real Time RT-PCR反應(yīng)等。

描述:

該酶缺乏RNase H活性,延伸能力強(qiáng),可用于較長(zhǎng)cDNA合成、高比例全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)構(gòu)建、Real Time RT-PCR反應(yīng)等。


操作說(shuō)明:cDNA第一鏈合成反應(yīng)體系1) 試劑融化后,將試劑盒中各組分混勻并稍微離心后置于冰上。2) 按順序加入以下反應(yīng)物:3) 如果RNA模板GC含量高或者含有二級(jí)結(jié)構(gòu),可先將RNA模板和Water(RNase-Free)混勻后,65℃孵育5min,冰上冷卻,再加入其它組分。4) 3) 輕輕混勻,離心。42℃孵育15-30min。如果RNA模板中不含poly A結(jié)構(gòu),25℃先孵育5min,隨后42℃孵育15-30min。反應(yīng)產(chǎn)物可直接用于PCR,如果不立即使用,-20℃保存少于一周,長(zhǎng)時(shí)間保存建議-70℃放置。注意:有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,本反轉(zhuǎn)錄酶可在15min內(nèi)完成1kb反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

注意事項(xiàng):1. 用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者購(gòu)買(mǎi)已經(jīng)證明無(wú)核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過(guò)程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染。2. 確保所用試劑及超純水中無(wú)RNA酶污染。3. 純化過(guò)的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會(huì)干擾第 鏈cDNA的合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。4. 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴 次性手套操作。

銷售產(chǎn)品:Glabridin  | CID 16020046  | Pralsetinib  | MARK-IN-2  | Spermine  | Zoledronic Acid  | Hydroxychloroquine (sulfate)  | Aliskiren  | BD-1047 (dihydrobromide)  | Hydroxyurea

Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds


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