Taq DNA Ligase
MCE 國際站:Taq DNA Ligase
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件: -20°C,1 年
簡介:本品是從Thermus aquaticus HB8中克隆出的DNA連接酶,在大腸桿菌中進行重組表達后經(jīng)多次純化分離得到。
概述:本產(chǎn)品是從Thermus aquaticus HB8中克隆出的DNA連接酶,在大腸桿菌中進行重組表達后經(jīng)多次純化分離得到。Taq DNA連接酶能夠催化磷酸二酯鍵的形成,使雜交到同一互補靶DNA鏈上的兩條契合寡核苷酸鏈的5′-磷酸末端和3′ -羥 基末端通過磷酸二酯鍵連接。只有當(dāng)兩條寡核苷酸鏈與互補靶DNA配對并且兩條寡核苷酸鏈之間沒有空隙的條件下才可發(fā)生。因此,可以用它來檢測單堿基替換。在45~65℃范圍內(nèi),Taq DNA連接酶均有活性。
描述:
Taq DNA 連接酶催化磷酸二酯鍵的形成,通過磷酸二酯鍵將與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相符寡核苷酸鏈的 5'-磷酸末端和 3'-羥基末端連接起來。這種連接反應(yīng)只有在兩條寡核苷酸鏈與互補靶 DNA 配對,且兩條寡核苷酸鏈之間沒有間隙時才能發(fā)生。因此,它可用于檢測單堿基替換。Taq DNA 連接酶在 45 至 65°C 范圍內(nèi)有活性。
操作說明:常用反應(yīng)體系(50 μL)反應(yīng)條件:45℃溫育15min。加入終止染液(50%甘油, 50mM EDTA和溴酚蘭)終止反應(yīng)。
注意事項:1. 本酶需NAD+作輔因子,10×Taq Ligase Reaction Buffer中 已含NAD+,緩沖液應(yīng)于-70℃貯存,以延長NAD+的半衰 期。2.1×Taq Ligase Reaction Buffer: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6, 25℃), 25 mM KAc, 10 mM Mg(Ac)2, 10 mM DTT, 1 mM NAD和0.1% Triton X-100,45℃溫育。 3.Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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