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細胞凍存管的使用步驟介紹

閱讀:1069        發(fā)布時間:2023-2-26
凍存管一般用作實驗室細胞的低溫保藏。凍存管又名冷凍管,是常用的實驗耗材,多用于生物、醫(yī)藥、食品等行業(yè)。
 
使用步驟:
 
⑴ 從細菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥氏比濁度的菌懸液接種與菌種保存管中。
⑵ 擰緊保存管,來回顛倒4-5次使細菌乳化,不能旋搖。
⑶ 把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)
 
細胞凍存后如何復蘇?
 
1. 細胞實驗室進行常規(guī)消毒,紫外照射30 min以上,超凈臺開啟通風10 min。
 
2. 將新鮮培養(yǎng)基置于37℃恒溫水浴鍋中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭,移入無菌操作臺內(nèi)。將10 ml左右新鮮培養(yǎng)基移入無菌細胞培養(yǎng)瓶中,備用。
 
3. 從液氮保存罐中取出凍存管,立即放入40℃水浴中,輕搖冷凍管使其在快速全部融化,以70 % 酒精擦拭凍存管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。
 
4. 將細胞懸液移入已加培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)瓶中,放CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
5. 待細胞貼壁后(根據(jù)細胞種類貼壁時間不同,一般4小時左右),棄去含有冷凍保護劑的培養(yǎng)基,加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 

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