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FITC-Glucan,即熒光素異硫氰酸酯(Fluorescein Isothiocyanate,簡稱FITC)標(biāo)記的葡聚糖,是一種重要的科研試劑。以下是對FITC-Glucan的詳細(xì)介紹:
結(jié)構(gòu):FITC-Glucan是通過將熒光素異硫氰酸酯與葡聚糖結(jié)合而得到的化合物。
外觀:通常以黃色/橙色粉末形式供應(yīng),也可以黃色溶液形態(tài)的鹽溶液形式供應(yīng)。
溶解性:可溶于水,并能在某些極性有機(jī)溶劑如DMSO、甲酰胺中溶解,但不溶于低級脂肪醇、丙酮、氯仿、二甲基甲酰胺。
熒光特性:具有強(qiáng)烈的綠色熒光,激發(fā)波長通常為495nm,發(fā)射波長為520nm。
細(xì)胞和組織中的滲透性和運(yùn)輸研究:
通過測量熒光,F(xiàn)ITC-Glucan可以提供健康或患病組織的實(shí)時滲透性定量數(shù)據(jù)。
已應(yīng)用于腸道組織、腦和神經(jīng)系統(tǒng)、腫*組織、眼內(nèi)以及腎組織的滲透性研究。
pH探針:
FITC-Glucan可用作細(xì)胞中的pH探針,用于監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)的酸堿環(huán)境變化。
其他應(yīng)用:
還可用于過濾器、凝膠等材料的滲透性研究。
在生物學(xué)研究中,可用于標(biāo)記細(xì)胞結(jié)構(gòu)或分析生物分子的位置和動態(tài)。
儲存條件:應(yīng)冷藏于-20℃的環(huán)境中,以確保其穩(wěn)定性和活性。
穩(wěn)定性:
FITC-Glucan在體外和體內(nèi)的穩(wěn)定性都非常好,只有在高pH(>9)和高溫下,熒光素標(biāo)記才有發(fā)生水解的風(fēng)險。
在特定的研究條件下(如兔血漿、肌勻漿、肝勻漿和尿液中),F(xiàn)ITC-Glucan的穩(wěn)定期均不短于3天。
雖然具體的制備和標(biāo)記步驟可能因?qū)嶒?yàn)要求和樣品特性而有所不同,但通常包括以下基本步驟:
準(zhǔn)備FITC-Glucan溶液:將FITC溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,然后加入葡聚糖溶液,攪拌使其充分混合?/p>
反應(yīng):將FITC-Glucan溶液加入到待標(biāo)記的樣品或生物分子中,使其與目標(biāo)分子發(fā)生反應(yīng)。具體的反應(yīng)條件(如反應(yīng)時間、溫度等)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。
反應(yīng)停止與洗滌:在一定的反應(yīng)時間后,通過加入抑制劑或洗滌液來停止反應(yīng),并去除未反應(yīng)的FITC-Glucan和雜質(zhì)。
分析和觀察:使用熒光顯微鏡或其他熒光分析技術(shù)對標(biāo)記后的樣品進(jìn)行觀察和分析,以獲得標(biāo)記的結(jié)果。
安全性:僅用于科研目的,不能用于人體實(shí)驗(yàn)。
操作規(guī)范:在制備和使用FITC-Glucan時,應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)程,避免與皮膚、眼睛等直接接觸。
質(zhì)量控制:為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)對FITC-Glucan進(jìn)行質(zhì)量控制,包括純度、熒光強(qiáng)度等方面的檢測。
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