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辣根過氧化物酶標記3-硝基-L-酪氨酸

辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase，HRP）是臨床檢驗試劑中的常用酶，它不但廣泛用于多個生化檢測項目，也廣泛運用于免疫類（ELISA）試劑盒。而3-硝基-L-酪氨酸（3-Nitro-L-tyrosine）則是一種化學物質，其外觀為黃色至綠色粉末。關于辣根過氧化物酶標記3-硝基-L-酪氨酸這一組合，具體介紹如下：

一、HRP標記3-硝基酪氨酸（3-NT-HRP）

該制品是以3-硝基酪氨酸（3-NT）與辣根過氧化物酶（HRP）經(jīng)化學交聯(lián)獲得的標記物。它可溶于PBS（pH7.4）中，蛋白濃度≥1mg/ml，并含有BSA及甘油等酶穩(wěn)定劑。此標記物可作為標記物用于抗體的制備，或用于3-硝基酪氨酸及其抗體的檢測。經(jīng)稀釋后，它還可用于ELISA檢測，效價≥1:5000。

二、蛋白質酪氨酸硝化

定義：蛋白質硝化（Protein Nitration）是一種重要的蛋白質翻譯后的選擇性修飾，一般是指蛋白質酪氨酸殘基硝化成3-硝基酪氨酸（3-Nitrotyrosine，3-NT）。

影響：蛋白質酪氨酸硝化（Protein Tyrosine Nitration）可以導致一些酶的失活，影響酪氨酸磷酸化調節(jié)的信號傳導，還可以通過改變細胞的細微結構導致細胞凋亡。

與疾病的關系：蛋白質酪氨酸的硝化可能參與許多疾病的發(fā)生和發(fā)展。

體內途徑：

一種是活性氮（Reactive Nitrogen Species，RNS）如ONOO-等介導的。

另一種是含卟啉過氧化物酶催化亞硝酸鹽氧化生成的。

生物檢測標志：病理情況下，體內產(chǎn)生的活性氧（O2-、HO-、H2O2、ONOO-等）和活性氮（NO-、NO2-、N2O3等），除了直接造成氧化損傷外，還可與蛋白質酪氨酸殘基或游離酪氨酸反應發(fā)生硝化，生成穩(wěn)定的代謝產(chǎn)物3-NT。正常人體血漿酪氨酸濃度大約為100mmol/L，這不僅為體內酪氨酸的硝基化提供了可能，也使其產(chǎn)物3-NT成為了組織和細胞損傷的一個生物檢測標志。3-NT比較穩(wěn)定，作為檢測組織和細胞氧化損傷的一個生物標志已受到廣泛關注。

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