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讀板器原理

2025-1-8  閱讀(222)

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讀板機(jī)可以進(jìn)行吸光度測(cè)量、熒光測(cè)量等,每種都有不同的測(cè)量原理、特點(diǎn)和注意事項(xiàng),所以我們分兩部分進(jìn)行解釋。無(wú)論哪種情況,都需要單色(單波長(zhǎng))光,并且使用濾光器或單色儀來(lái)選擇波長(zhǎng)。

1. 吸光度測(cè)量

通過(guò)用所需波長(zhǎng)的光照射微孔板中的樣品并測(cè)量穿過(guò)另一側(cè)樣品的光的強(qiáng)度來(lái)確定吸光度。如果可以測(cè)定吸光度,則根據(jù)比爾-朗伯定律,吸光度與濃度成正比,因此可以通過(guò)將未知濃度的樣品與已知濃度的校準(zhǔn)曲線樣品進(jìn)行比較來(lái)確定其濃度。

但是,如果微孔板被劃傷或弄臟,或者樣品中存在氣泡,吸光度可能無(wú)法正確測(cè)量,并且可能會(huì)高于原始值。

2. 熒光測(cè)量

通過(guò)用特定波長(zhǎng)(激發(fā)波長(zhǎng))的光照射微孔板中的樣品,測(cè)量從樣品發(fā)出的特定波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度。這利用了熒光物質(zhì)的特性,熒光物質(zhì)通過(guò)吸收特定波長(zhǎng)帶而變成激發(fā)態(tài),并在返回基態(tài)時(shí)發(fā)射能量。

這種能量以熱和光的形式發(fā)射,兩者都與濃度成正比,因此可以通過(guò)檢測(cè)光來(lái)量化。由于它檢測(cè)樣品中特定化學(xué)物質(zhì)本身發(fā)出的熒光,因此具有能夠進(jìn)行高靈敏度和高精度測(cè)量的特點(diǎn)。


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