外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡,其內(nèi)部包裹了多種蛋白質(zhì)、mRNA、non-coding RNA等分子。外泌體主要來源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。無外泌體血由細(xì)胞分泌釋放后,通過個(gè)種體液在體內(nèi)傳播,被靶細(xì)胞攝入后,釋放內(nèi)部的生物分子,參與細(xì)胞間的通訊,調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。
就目前而言幾乎所有類型的細(xì)胞都可以產(chǎn)生并釋放外泌體,不同的生物體液(血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、腹水)中都發(fā)現(xiàn)有大量外泌體存在,外泌體由細(xì)胞分泌釋放后,通過個(gè)種體液在體內(nèi)傳播,被靶細(xì)胞攝入后,釋放內(nèi)部的生物分子,參與細(xì)胞間的通訊,調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。
無外泌體血清滅活工藝流程:
1.選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)
2.對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水
3.溫度預(yù)試:對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
4.無外泌體血清滅活血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí),定時(shí)30分鐘。
5.大瓶無外泌體血清滅活后,進(jìn)行分裝
6.保存:分裝后,無外泌體血清抽樣做無菌試驗(yàn),-20~-70℃保存。
無外泌體血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的無外泌體血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒有必要的。