胎牛血清，由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能：提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。起酸堿度緩沖液作用。胎牛血清還是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源，并提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。除此之外，胎牛血清在細(xì)胞消化過(guò)程中提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
防止胎牛血清在培養(yǎng)中產(chǎn)生黑點(diǎn)的有效方法：
?。?） 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
?。?） 培養(yǎng)基無(wú)需 37℃水浴。
?。?） 培養(yǎng)基保持JIA PH 值 7.0- 7.2。
?。?） 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗。
?。?） 掌握細(xì)胞傳代的JIA時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。
1、 化凍
將血清從-20 度冰箱中取出，室溫（或浸于自來(lái)水中）化凍（約需要 30 分鐘至 2 小時(shí)，也可放于 4 度冰箱化凍過(guò)夜；化凍后若不馬上滅活，可以放入 4 度冰箱中暫時(shí)保存）
2、滅活
（1）放入室溫的水浴鍋內(nèi)開(kāi)始加熱（同時(shí)放入一個(gè)空的血清瓶，內(nèi)裝 100ml 自來(lái)水，插入一根溫度 計(jì)，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）
?。?）當(dāng)溫度計(jì)顯示 56 度時(shí)，停止加熱，改為間斷加熱，維持 56 度（±0.5 度）30 分鐘（±3 分鐘； 若不小心使溫度上升超過(guò) 56 度，則：若仍未超過(guò) 60 度，且時(shí)間很短，比如不超過(guò) 5 分鐘，則仍可使 用；若超過(guò) 60 度，或者時(shí)間較長(zhǎng)，則棄去不用，或者嘗試用于一些普通細(xì)胞的培養(yǎng)）
（3）取出，自然冷卻至室溫（約需 1-3 小時(shí)） ，可分裝或-20 度繼續(xù)凍存。
3、分裝
（1）轉(zhuǎn)入無(wú)菌間，在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入 10ml 離心管中（注意預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻； 用吸液管或吹大管吹出血清時(shí)要注意：不要吹出氣泡（血清很粘稠，很容易產(chǎn)生氣泡；如果產(chǎn)生氣泡， 則在酒精燈火焰上過(guò)一下） ）
（2）放入-20 度冰箱凍存
?。?）全部操作約需要 4-6 小時(shí)
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