磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)是一種緩沖溶液,通常用于免疫組織化學(xué)(IHC)染色,并且經(jīng)常用于生物學(xué)研究中。 PBS是一種水性鹽溶液,包含磷酸氫鈉,氯化鈉,在某些情況下還包含氯化鉀和磷酸二氫鉀。
如何制作PBS緩沖液?
稱重10.9g無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4),3.2g無水磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和90g氯化鈉(NaCl)。溶于1L蒸餾水。
將pH調(diào)節(jié)至7.4,使溶液的終體積達(dá)到1L。
使用前將其稀釋10倍,必要時(shí)重新調(diào)節(jié)pH值。
通過向1L溶液中加入5mL Tween 20,可以制成含0.5%Tween 20的PBS溶液。
制作PBS緩沖液的技巧
配制PBS溶液后,將緩沖液保存在室溫下。
非無水試劑可以代替,但您必須重新計(jì)算每種試劑的適當(dāng)質(zhì)量,以容納添加的水分子。
PBS緩沖液的用途:
磷酸鹽緩沖鹽水具有許多用途,因?yàn)樗鼘?duì)大多數(shù)細(xì)胞均等滲且無毒。它可以用于稀釋物質(zhì),通常用于沖洗細(xì)胞容器。 PBS可以在各種方法中用作稀釋劑來干燥生物分子,因?yàn)槠渲械乃肿訉@物質(zhì)(例如蛋白質(zhì))結(jié)構(gòu)化。將其“干燥”并固定在固體表面上。
pH值保持穩(wěn)定且一致,以防止細(xì)胞破壞。
與該物質(zhì)結(jié)合的水薄膜可防止變性或其他構(gòu)象變化。碳酸鹽緩沖液可用于相同目的,但效果較差。
在橢圓偏光法中測量蛋白質(zhì)吸附時(shí),PBS也可用于獲取參考光譜。