胎牛血清幾乎是通用的生長添加物,適合動物、人和昆蟲細(xì)胞等許多類型細(xì)胞的培養(yǎng),因此使用血清不需要為每一類細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基,節(jié)省了大量時間和精力。
胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內(nèi))血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn):低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。
哪些原因容易導(dǎo)致血清沉淀:
1.溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導(dǎo)致沉淀。
2.血清在室溫或4℃冰箱放置時間太久,血清中的不穩(wěn)定成分會被破壞,影響細(xì)胞生長效果;導(dǎo)致血清品質(zhì)變差,也會產(chǎn)生沉淀。
3.血清分裝凍存時,注意在不產(chǎn)生氣泡的情況下?lián)u晃均勻,避免因血清成分濃度改變產(chǎn)生沉淀。
4.血清滅活后容易產(chǎn)生沉淀,如需使用滅活血清,請按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度過高、時間過長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
5.如有血清沉淀,分裝后進(jìn)行離心處理,建議400g離心5分鐘,取上清使用。
胎牛血清的解凍:
?、?請在2℃~8℃環(huán)境中解凍,不宜在較高溫度下進(jìn)行解凍;解凍溫度較高會導(dǎo)致血清渾濁,沉淀增加,品質(zhì)下降;
?、?血清解凍的過程中請不時搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產(chǎn)生;
?、?血清解凍后應(yīng)盡快用完,盡量避免反復(fù)凍融;
④ 血清不宜在室溫中長時間放置,使用后盡快放回2℃~8℃中;
?、?高溫解凍、劇烈搖晃、反復(fù)凍融、放置時間過長等,均會導(dǎo)致血清品質(zhì)的降低。
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