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大小鼠COPD熏煙造模方法的經(jīng)驗小結(jié)

時間:2023/10/29閱讀:1412
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近年來,由于空氣環(huán)境,吸煙,用藥等各種因素原因?qū)е履壳霸谖覈宰枞苑渭膊?COPD,即慢阻肺)成為一種常見、多發(fā)、高致殘率和高致死率慢性呼吸系統(tǒng)疾病,它的發(fā)生與肺部對有害氣體或顆粒氣溶膠的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)。慢阻肺的特征是慢性氣道炎癥,黏液高分泌、氣道重塑,和肺氣腫,隨著病情反復(fù)發(fā)作、急性加重,導(dǎo)致肺功能逐漸下降呼吸困難。在研究慢阻肺的形成,發(fā)展以及治療和有效預(yù)防中,建立理想的實驗動物模型是極其重要的基礎(chǔ)和條件。

目前COPD動物造模的方法中,熏煙實驗即采用長時間香煙煙氣對動物進行暴露的方法被證明為比較理想的方法。根據(jù)我們多年來接觸的不同實驗方法分類總結(jié)一下經(jīng)驗:

一. 經(jīng)典的實驗方案:

實驗動物

小鼠(或大鼠)

實驗設(shè)備

動物COPD熏煙造模系統(tǒng)(如德伯科技CAMP-AFW系統(tǒng))

熏煙周期

6個月

熏煙時間

每天兩次,兩次間間隔4個小時以上,每周至少5天

單次熏煙

每次1小時

用煙數(shù)量

符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣條件下每次不少于1根香煙/動物

煙氣濃度

不小于350mg/m3(PM表征條件下)

注:符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣需要專業(yè)的香煙抽煙機器人或香煙發(fā)生器實現(xiàn),市售線性煙氣發(fā)生器發(fā)生的煙氣濃度往往過大,需和ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣做校準(zhǔn)后方有參考意義。

 二. 急性造模方案:

實驗動物

小鼠(或大鼠)

實驗設(shè)備

動物COPD熏煙造模系統(tǒng)(如德伯科技CAMP-AFW系統(tǒng))

熏煙周期

<2月

熏煙時間

每天兩次,兩次間間隔4個小時以上,每周至少5天

單次熏煙

每次1小時

用煙數(shù)量

符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣條件下每次不少于1根香煙/動物

煙氣濃度

不小于350mg/m3(PM表征條件下)

LPS注射

在第15天,第45天分布注射一次LPS,總次數(shù)不得超過兩次

注:增加了LPS注射會大大縮短熏煙造模周期,但會提高動物死亡率,特別是小鼠。

熏煙造模結(jié)果評價:

僅熏煙造模時對照組動物幾乎無死亡且呼吸均勻,毛發(fā)光澤,食量及活動正常。增加LPS注射時會造成動物有死亡情況。

造模組動物觀察結(jié)果多為:陸續(xù)出現(xiàn)流鼻涕、打噴嚏、咳嗽、眼角有血樣分泌物、呼吸有啰音、毛色枯黃無光澤等現(xiàn)象。甚至部分有脫毛現(xiàn)象,躁動,倦怠蜷縮,腹部脹大,出現(xiàn)點頭運動,甚者張口呼吸等明顯癥狀。病理結(jié)果為:顯示柱狀細(xì)胞增加,炎癥細(xì)胞浸潤。

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