安捷倫1260液相色譜儀操作的注意事項
(一)運行環(huán)境要求
安捷倫1260液相色譜儀的運行環(huán)境要求是為了儀器的正常合理運轉及其保養(yǎng),應該將儀器放置在平穩(wěn)固定的臺面上,要求臺面無振動,周圍磁場。“要保持干凈無灰塵,儀器工作的溫度大致范圍要求是在15~30℃,周邊空氣的相對濕度在30%~80%之間"。另外,因為流動相大多數(shù)是有機溶劑,我們還要保持室內(nèi)有一些排風扇等通風換氣的設施設備。
(二)開機維護
首先檢查檢測使用的流動相以及色譜柱是否準確無誤,然后再打開儀器的穩(wěn)壓電源,而后再開輸液泵、柱箱。設置好色譜柱的大保護柱壓,進行排氣工作,并要確保流路時不會有氣泡。這是因為氣泡會擴大基線的噪聲率,造成安捷倫1260液相色譜儀靈敏度不斷下降,如果有氣泡,氣泡里的氧氣還會氧化儀器組件,影響機器的性能指標。而關于流速切不可操之過急,我們應該從小到大一點點地加速,這樣是為了更好地保護色譜柱。與此同時,還要注意仔細觀察,觀察柱壓與流速能否保持相對應的平穩(wěn)和合理增加,待到流速已經(jīng)達到所需要的流速并終讓柱壓穩(wěn)定之后,然后再讓檢測器工作,這樣有利于延長檢測器的使用壽命。
(三)柱前維護
由于臨床上的樣本多為較為復雜的混合物,而這些填料都是很細小的,并且色譜柱的內(nèi)腔容積非常小,這就會導致堵塞現(xiàn)象。同樣,溶液里的細小微粒也會加大進樣閥、泵頭內(nèi)的藍寶石活塞桿和活塞的堵塞和磨損概率。安捷倫1260液相色譜儀用緩沖鹽的時候,緩沖鹽溶液會產(chǎn)生高壓析鹽情況,會產(chǎn)生一些小的鹽粒,這些鹽粒會附著在活塞桿上,并會隨著活塞桿運動,這就很容易使儀器產(chǎn)生劃痕現(xiàn)象,磨損儀器中的密封墊,從而產(chǎn)生漏液等問題。使用梯度比例閥時,當鹽溶液與有機溶劑溶液混合時,鹽溶液能夠實現(xiàn)與有機溶液有效重新融合并不會出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。假如在比例閥的混合點上,由于重力的因素使鹽顆粒慢慢沉淀下來,通常閥A接水相鹽溶液,D接有機溶劑,此連接法可有效使鹽回落到鹽溶液中并被溶解。但是,假若把這個連接法顛倒過來,這些鹽可能落在有機溶劑之中,從而容易出現(xiàn)問題。因此,當使用緩沖鹽溶液和有機溶劑時,建議要將緩沖鹽的通道接在A通道上,而將有機溶液的通道直接接在D通道上。
(四)關機維護
實驗完成后,要把色譜柱沖洗干凈。首先要去完成的就是關掉檢測器,之所以要這樣做是為了節(jié)約光源,保證儀器燈的有效使用年限。另外,還要切斷色譜柱與檢測器的連接程序,之所以這樣是為了防止污染檢測池。用流動相沖洗流路30多min,然后再用15%的甲醇水洗10min左右,后再用純甲醇沖30min左右,并用一些純化水同時沖外流路等地方。輸液泵的流速應慢速減小到0時,才可關閉泵和穩(wěn)壓器?!胺聪嘞到y(tǒng)用90%~95%有機相+10%~5%水相封存反相色譜柱",兩端封死。如長時間存放可將柱子*浸泡在有機相內(nèi),以防用純有機相封存反相色譜柱,如果長期保存有機相會揮發(fā)。