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目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> A4000Klenow Fragment(exo-)試劑

Klenow Fragment(exo-)試劑
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參考價 750
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
750
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 雅吉生物
  • 型號 A4000
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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>

更新時間:2024-11-01 14:46:01瀏覽次數(shù):194評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000U
貨號 A4000 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
Klenow Fragment(exo-)試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

Klenow Fragment(exo-)試劑是DNA聚合酶I的N末端截短物,它保留了DNA聚合酶活性,但5′-3′ 核酸外切酶活性缺失。該酶進一步經(jīng)點突變

(D355A,E357A)去除了其 3′-5′的核酸外切酶活性。因此該DNA聚合酶無任何外切酶活性,僅包含了DNA聚合酶活性,

廣泛用于標記探針制備、cDNA 第二條鏈的合成等建庫試驗。

包裝

組分名稱數(shù)量

Klenow Fragment(exo-) (10 U/μl)100 μl

*10×Klenow Buffer1 ml

*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT. 該酶兼容PCR Buffer和內(nèi)切酶Buffer。

單位定義

一個活力單位即在37°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

應(yīng)用

用隨機引物制備探針

隨機引物法標記

cDNA 第二條鏈的合成

該酶不能用于產(chǎn)物平端不齊

儲存

-20°C可保存3年。

失活

75°C,20min失活。


Klenow Fragment(exo-)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達平臺期)。

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應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

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應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)


以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產(chǎn)品歡迎咨詢。





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