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貨號(hào) | C2003 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
Strep tagII Benzonase核酸酶試劑是一種核酸內(nèi)切酶,可將核酸降解成2~5個(gè)堿基的5‘單磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形
(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀)的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性,又被稱為“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降低
蛋白樣品粘度,去除蛋白樣品中核酸的污染,且無蛋白酶活性殘留,核酸酶活性達(dá)1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶
在降低粘性的同時(shí), 也具有多種其他用途,如:減少了樣品處理時(shí)間,增加了蛋白產(chǎn)量,離心時(shí)時(shí)沉淀和上清分離的更,
更便于溶液的離心(尤其是超濾);提高色譜純化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四種,分別為不含任何標(biāo)簽的Benzonase核酸酶(科研級(jí)別)、無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶、
Strep tagII Benzonase核酸酶(科研級(jí)別)和無內(nèi)毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶,可適應(yīng)不同下游用途的需求。
其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除,而無內(nèi)毒素的兩種Benzonase
核酸酶,內(nèi)毒素含量<40EU/mL(按照單位換算量計(jì)算為,每1000U中含有的內(nèi)毒素<0.15EU),
可適用于藥用級(jí)別的研發(fā)和生產(chǎn)。另外,核酸酶殘留可通過我公司開發(fā)的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒
進(jìn)行評(píng)測(cè),15min即可完成檢測(cè),可檢測(cè)到2ng/ml的核酸酶殘留。
用量推薦
實(shí)驗(yàn)類型電泳蛋白樣品制備非藥物蛋白生產(chǎn)藥物蛋白生產(chǎn)疫苗、病毒生產(chǎn)細(xì)胞藥物
推薦產(chǎn)品Benzonase(科研級(jí))Benzonase(科研級(jí))
Strep-tagII Benzonase(科研級(jí))Benzonase(無內(nèi)毒素級(jí))
Strep-tagII Benzonase(無內(nèi)毒素級(jí))
細(xì)胞數(shù)量1X106個(gè)細(xì)胞(10mg組織)1g濕重 (重懸液10mL)1L 發(fā)酵上清液1L 培養(yǎng)物
用量125U (0.5 µL)25U/mL(1 µL)25U/mL(1 µL)0.1U/mL(0.4 µL)0.1U/mL(0.4 µL)
推薦用量500U (2 µL)250U/mL(10 µL)250U/mL(10 µL)25U/mL(100 µL)5U/mL(20 µL)
作用時(shí)間通常作用時(shí)間37℃在15~60min;25℃在30~120min;
單位定義
37℃,pH 8.0反應(yīng)條件下,在30分鐘內(nèi)使△A260 值降低1.0(相當(dāng)于消化37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。
注意:含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品,對(duì)該酶活性有部分抑制作用,使用時(shí)需要增加酶的用量。
應(yīng)用
蛋白提取時(shí)去除核酸污染:在重組蛋白純化或組織細(xì)胞樣品蛋白提取時(shí),Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度,利于下游操作
與細(xì)胞或細(xì)菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量
減少存放的外周血單細(xì)胞(PBMC)的結(jié)塊現(xiàn)象
降解核酸,利于不可溶性蛋白復(fù)性前高質(zhì)量包涵體制備
有效去除帶負(fù)電荷的核酸對(duì)雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響,改善蛋白質(zhì)的分離效果,增強(qiáng)2-DE分辨率
疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除
儲(chǔ)存
置于-20°C,可保存2年。
Strep tagII Benzonase核酸酶試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示
應(yīng)用實(shí)例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果,可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。
應(yīng)用實(shí)例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。
應(yīng)用實(shí)例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。
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