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賽默飛熒光定量PCR儀是干什么的

2024-12-25  閱讀(137)

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賽默飛熒光定量PCR儀是一款用于定量檢測(cè)核酸(DNA或RNA)表達(dá)水平的先進(jìn)儀器,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、醫(yī)學(xué)檢測(cè)、疾病診斷和環(huán)境研究等領(lǐng)域。熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)過(guò)程中熒光信號(hào)的累積情況,精準(zhǔn)地定量核酸模板的起始拷貝數(shù),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)、突變、拷貝數(shù)和核酸定量的分析。

賽默飛的熒光定量PCR儀以其高精度、靈敏度和穩(wěn)定性受到科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院和工業(yè)實(shí)驗(yàn)室的廣泛認(rèn)可,常見型號(hào)包括 QuantStudio 系列,例如 QuantStudio 3、QuantStudio 5、QuantStudio 6 Flex 和 QuantStudio 7 Pro 等。


熒光定量PCR技術(shù)簡(jiǎn)介

熒光定量PCR(qPCR)是一種結(jié)合了 PCR 和實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)技術(shù)的分子生物學(xué)工具,其原理包括:

  1. 核酸擴(kuò)增:

    • 核酸通過(guò)熱循環(huán)過(guò)程(變性、退火、延伸)實(shí)現(xiàn)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增。

  2. 熒光標(biāo)記:

    • 通過(guò)使用熒光染料(如SYBR Green)或熒光探針(如TaqMan探針)標(biāo)記擴(kuò)增產(chǎn)物,在每個(gè)PCR循環(huán)中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化。

  3. 熒光檢測(cè)與定量:

    • 熒光信號(hào)的累積與DNA擴(kuò)增量成正比,熒光定量PCR儀通過(guò)光電檢測(cè)器實(shí)時(shí)采集信號(hào),生成擴(kuò)增曲線并計(jì)算起始模板數(shù)量。


賽默飛熒光定量PCR儀的特點(diǎn)

  1. 高靈敏度與精度

    • 賽默飛熒光定量PCR儀配備高性能光學(xué)系統(tǒng),可實(shí)時(shí)捕捉微弱的熒光信號(hào),靈敏度高達(dá)單拷貝水平。

    • 精確的熱循環(huán)控制系統(tǒng)確保每次擴(kuò)增的一致性,保證結(jié)果的高精度和可重復(fù)性。

  2. 多重檢測(cè)能力

    • 支持多通道檢測(cè),可同時(shí)分析多種靶標(biāo)(如多重?zé)晒鈽?biāo)記的探針)。

    • QuantStudio 系列支持 4 至 6 種熒光染料,滿足復(fù)雜實(shí)驗(yàn)需求。

  3. 智能化與自動(dòng)化

    • 內(nèi)置用戶友好的觸控操作界面,提供直觀的實(shí)驗(yàn)設(shè)置和實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)監(jiān)控。

    • 高級(jí)型號(hào)支持云端數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和分析功能,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)共享與遠(yuǎn)程操作。

  4. 廣泛的樣本適配

    • 支持多種格式的實(shí)驗(yàn)板(96孔板、384孔板、快速孔板)和管(如0.2 mL PCR管),靈活適配不同實(shí)驗(yàn)需求。

    • 能夠高效處理RNA反轉(zhuǎn)錄后的cDNA擴(kuò)增和DNA直接擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。

  5. 精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)

    • 溫控精度高(±0.1°C),熱循環(huán)模塊均勻性良好,確保擴(kuò)增反應(yīng)的高效性和準(zhǔn)確性。

    • 快速升降溫功能提高實(shí)驗(yàn)效率。

  6. 高效軟件分析

    • 提供全面的數(shù)據(jù)分析軟件,支持相對(duì)定量、絕對(duì)定量、基因表達(dá)分析、基因分型等多種分析模式。

    • 支持Ct值分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作和基線調(diào)整等功能,直觀呈現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

  7. 穩(wěn)定與可靠性

    • 賽默飛PCR儀設(shè)計(jì)堅(jiān)固耐用,適合長(zhǎng)期高頻次使用。

    • 設(shè)備運(yùn)行穩(wěn)定,能夠處理高通量實(shí)驗(yàn)。


常見型號(hào)及其性能

QuantStudio 3

  • 入門級(jí)熒光定量PCR儀,適合小型實(shí)驗(yàn)室或教學(xué)使用。

  • 特點(diǎn):

    • 支持 4 通道檢測(cè)。

    • 操作界面友好,適合基礎(chǔ)應(yīng)用。

    • 數(shù)據(jù)可上傳至云端,便于存儲(chǔ)與共享。

QuantStudio 5

  • 適合科研實(shí)驗(yàn)室和臨床研究,性能更強(qiáng)。

  • 特點(diǎn):

    • 支持 96 孔板和 384 孔板。

    • 可實(shí)現(xiàn)多靶標(biāo)同時(shí)檢測(cè)。

    • 提供更強(qiáng)的數(shù)據(jù)分析能力。

QuantStudio 6 Flex

  • 靈活性更高,支持多樣化實(shí)驗(yàn)需求。

  • 特點(diǎn):

    • 支持模塊切換,適配 96 孔板、384 孔板和 TaqMan Array。

    • 滿足高通量實(shí)驗(yàn)需求。

QuantStudio 7 Pro

  • 智能化儀器,適合高要求的科研與臨床實(shí)驗(yàn)。

  • 特點(diǎn):

    • 配備智能化操作系統(tǒng),支持語(yǔ)音控制。

    • 自動(dòng)化程度高,可與實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)集成。

    • 提供更高的靈敏度和數(shù)據(jù)處理能力。


主要應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 基礎(chǔ)科研

    • 基因表達(dá)分析:研究基因的差異表達(dá)。

    • 基因拷貝數(shù)分析:檢測(cè)基因組中特定基因的拷貝數(shù)變化。

    • miRNA 定量:分析非編碼RNA的表達(dá)水平。

  2. 疾病診斷

    • 病毒檢測(cè):檢測(cè)新冠病毒、流感病毒等。

    • 遺傳疾病分析:檢測(cè)致病突變、單核苷酸多態(tài)性(SNP)。

    • 癌癥分子標(biāo)記物檢測(cè):如腫瘤標(biāo)志物的定量檢測(cè)。

  3. 食品與環(huán)境檢測(cè)

    • 食品中的微生物檢測(cè),如細(xì)菌或病毒污染。

    • 轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)。

    • 環(huán)境樣本中污染物的分子檢測(cè)。

  4. 藥物研發(fā)

    • 藥物靶標(biāo)基因表達(dá)研究。

    • 藥物代謝基因的定量分析。

    • 藥物敏感性與耐藥基因檢測(cè)。

  5. 法醫(yī)學(xué)

    • 親子鑒定。

    • 法醫(yī)樣本中DNA/RNA的定量分析。


賽默飛熒光定量PCR儀的優(yōu)勢(shì)

  1. 高精度與靈敏度

    • 能夠檢測(cè)微量樣本,擴(kuò)增反應(yīng)效率高,結(jié)果精確可靠。

  2. 操作便捷

    • 用戶界面簡(jiǎn)單直觀,新手易于上手。

    • 支持自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)流程,提高實(shí)驗(yàn)室效率。

  3. 廣泛適用性

    • 從基礎(chǔ)科研到臨床診斷,能夠適配多種實(shí)驗(yàn)類型。

    • 支持多種熒光染料和探針,靈活性強(qiáng)。

  4. 數(shù)據(jù)可追溯性

    • 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可上傳至云端存儲(chǔ),方便共享與追蹤。

  5. 實(shí)驗(yàn)優(yōu)化

    • 軟件提供擴(kuò)增曲線實(shí)時(shí)監(jiān)控和分析,幫助優(yōu)化PCR反應(yīng)條件。


如何選擇賽默飛熒光定量PCR儀?

  1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)規(guī)模:

    • 小規(guī)模實(shí)驗(yàn)或教學(xué)使用:選擇 QuantStudio 3

    • 中等規(guī)模實(shí)驗(yàn):選擇 QuantStudio 5。

    • 高通量實(shí)驗(yàn)或靈活性需求:選擇 QuantStudio 6 Flex。

    • 高要求科研或智能化需求:選擇 QuantStudio 7 Pro。

  2. 根據(jù)預(yù)算:

    • 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室:選擇入門級(jí)型號(hào)(QuantStudio 3 或 5)。

    • 研究需求:選擇高靈敏度、高性能的型號(hào)(QuantStudio 6 或 7)。

  3. 根據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域:

    • 臨床診斷:推薦 QuantStudio 5 或 7 Pro

    • 分子生物學(xué)研究:推薦 QuantStudio 5 或 6 Flex。


使用注意事項(xiàng)

  1. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

    • 確保反應(yīng)體系均一,避免氣泡產(chǎn)生。

    • 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)方案操作,確保模板、引物、探針的質(zhì)量。

  2. 儀器維護(hù)

    • 定期清潔光學(xué)系統(tǒng)和熱循環(huán)模塊,確保儀器長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行。

    • 按照使用說(shuō)明更換耗材。

  3. 數(shù)據(jù)分析

    • 確保正確設(shè)定Ct值閾值,避免假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。

    • 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。


總結(jié)

賽默飛熒光定量PCR儀是一款集精準(zhǔn)、靈敏和高效于一體的分子檢測(cè)工具,廣泛適用于多種領(lǐng)域。從基礎(chǔ)科研到臨床應(yīng)用,它以高性能和智能化設(shè)計(jì)為實(shí)驗(yàn)室提供了穩(wěn)定的解決方案。通過(guò)合理選擇型號(hào)和配置,可以顯著提升實(shí)驗(yàn)效率,為科研、診斷和工業(yè)領(lǐng)域提供有力支持。



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