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目錄:賽默飛世爾科技(中國)有限公司>>克隆與表達(dá)>> Dxy MMESSAGE MMACHINE T7 ULTRA 1 KIT

Dxy MMESSAGE MMACHINE T7 ULTRA 1 KIT
  • Dxy MMESSAGE MMACHINE T7 ULTRA 1 KIT
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mMESSAGEmMACHINE®T7Ultra試劑盒結(jié)合了新的帽類似物、抗反向帽類似物(ARCA)和獲得的高得率轉(zhuǎn)錄技術(shù),以生成RNA轉(zhuǎn)錄本,與翻譯后其他轉(zhuǎn)錄本相比可獲得更高的蛋白質(zhì)得率
    mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra 試劑盒結(jié)合了新的帽類似物、抗反向帽類似物 (ARCA) 和獲得的高得率轉(zhuǎn)錄技術(shù),以生成 RNA 轉(zhuǎn)錄本,與翻譯后其他轉(zhuǎn)錄本相比可獲得更高的蛋白質(zhì)得率。mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra 試劑盒的優(yōu)勢(shì):

    ?從體外轉(zhuǎn)錄的 RNA 合成更多蛋白
    ?可在體外體內(nèi)更高效地表達(dá) RNA 轉(zhuǎn)錄本
    ?使用隨附的多聚腺苷酸尾試劑穩(wěn)定體內(nèi)轉(zhuǎn)錄本

    ARCA 加帽 RNA 更具有翻譯活性
    ARCA 中的堿基修飾導(dǎo)致其僅以功能性、可翻譯的方向摻入;而傳統(tǒng)帽類似物被摻入的方向有功能性和非功能性兩個(gè)方向。因此,將 ARCA 摻入到轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中會(huì)產(chǎn)生 99% 可翻譯的加帽 RNA。在 mMESSAGE mMACHINE® T7 Ultra 轉(zhuǎn)錄本中加入了多聚腺苷酸尾,這進(jìn)一步得到了加強(qiáng)。對(duì)比 ARCA 和 ARCA/多聚腺苷酸尾轉(zhuǎn)錄本與帽類似物和帽類似物/多聚腺苷酸尾轉(zhuǎn)錄本的實(shí)驗(yàn)表明,使用 ARCA 加帽 RNA 時(shí)蛋白合成水平更高。

    什么是 ARCA?
    ARCA 是一個(gè)經(jīng)過修飾的帽類似物,其中 3' OH 基團(tuán)(接近 m7G)被 OCH3 替換(參見示意圖)。由于該取代,RNA 聚合酶只能使用剩余的羥基團(tuán)啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,迫使 ARCA 以正向摻入。因此,5' 端與 ARCA 合成的轉(zhuǎn)錄本 99% 可翻譯,導(dǎo)致對(duì)翻譯產(chǎn)生強(qiáng)刺激性效應(yīng)。

    對(duì)體外轉(zhuǎn)錄 RNA 進(jìn)行正確加帽
    對(duì) RNA 進(jìn)行正確加帽可促進(jìn)蛋白合成的正確啟動(dòng),以及體內(nèi) mRNA 的穩(wěn)定性和加工。無帽 RNA 在顯微注射或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中后會(huì)被細(xì)胞 RNase 快速降解。加帽 RNA 通常能在體外翻譯系統(tǒng)中更高效地翻譯,生成了具有僅以功能性方向摻入的帽類似物的 RNA。因此,用ARCA取代傳統(tǒng)的帽類似物能保證合成 99% 可翻譯的加帽 RNA。

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