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土壤芳基硫酸酯酶（Solid-aryl sulfatase，S-ASF）試劑盒說明書

微量法 100 管/48 樣

土壤芳基硫酸酯酶試劑盒

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

土壤芳基硫酸酯酶來自于土壤微生物，能酶促土壤有機硫化物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的無機態(tài)硫，在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營養(yǎng)代謝中具有重要的作用，是反映土壤質(zhì)量的一個重要生物學(xué)指標(biāo)。

測定原理：

S-ASF 能夠催化對-硝基苯硫酸鉀生成對-硝基ben酚，后者在 410nm 有特征光吸收。

試劑組成和配制：

試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 1.25ml 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存。

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。

測定步驟：

振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 15min

混勻， 37℃水浴 1h 后

充分混勻，室溫靜置 2min 后，10000g 25℃離心 10min，取 200μl 上清液于 410nm 處測定吸光值A(chǔ)，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設(shè)一個對照管。

SF 活力計算：

用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0066x -0.013；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。

S-ASF 活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0066×V 反總÷W÷T =19.09×(ΔA+0.013)

T：反應(yīng)時間，1h=1/24d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：2.625×10-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。

用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.0033x -0.013；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。

S-ASF 活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0033×V 反總÷W÷T =38.19×(ΔA+0.013)

T：反應(yīng)時間，1h=1/24d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：2.625×10-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。

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