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語純生物無外泌體胎牛血清與Gibco無外泌體胎牛血清對比報(bào)告
一.實(shí)驗(yàn)材料
無外泌體胎牛血清(語純生物)，無外泌體胎牛血清(GibcoA27208-03)，BMSC(CTCC)，DMEM高糖培養(yǎng)基(HycloneSH30243.01B)，100X青霉素-鏈霉素溶液(上海生工E607011-0100)，0.25%胰酶(碧云天C0201)，0.22μm濾膜(Millex)，外泌體提取試劑盒(貝博BB-3901-1)
二.實(shí)驗(yàn)儀器
細(xì)胞培養(yǎng)箱(ThermoScientific8000)，光學(xué)顯微鏡(上海精密儀器儀表有限公司XDS-1A)，倒置顯微鏡(OLYMPUS,IX71)，超凈工作臺(上海滬凈醫(yī)療器械有限公司SW-CJ-2D)，電熱恒溫水浴槽(賀德DK-08D)，超高速離心機(jī)(BeckmanOptinal-90K)
三.無外泌體胎牛血清制備方法
1.制備工藝和參數(shù)略；
2.用0.1μm的濾膜過濾上清液，即得無外泌體胎牛血清。
四.外泌體制備及鑒定
1.BMSC細(xì)胞在正常含FBS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定的時(shí)間后，細(xì)胞融合度約為60%-70%時(shí)，移去原有含血清的培養(yǎng)基，分別換成語純生物無外泌體胎牛血清和Gibco無外泌體胎牛血清；
2.繼續(xù)培養(yǎng)48h左右，細(xì)胞融合度達(dá)到80%-95%左右時(shí)收取上清液；
3.用外泌體提取試劑盒進(jìn)行外泌體提??；
4.通過電鏡和WesternBlot技術(shù)進(jìn)行外泌體鑒定，結(jié)果顯示語純生物無外泌體胎牛血清和Gibco無外泌體胎牛血清制備外泌體的效果基本一致。
