胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）是細(xì)胞代謝中的關(guān)鍵酶，催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸，同時生成 NADPH。CheKine™ 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測試劑盒（微量法）以其精準(zhǔn)、高效的檢測性能，為科研人員提供了一種理想的工具，助力深入探究 ICDHc 在細(xì)胞代謝、氧化還原調(diào)控及疾病機制中的關(guān)鍵作用。

ICDHc 的生理功能與作用機制

NADPH 生成的關(guān)鍵途徑

ICDHc 在細(xì)胞質(zhì)中催化異檸檬酸脫氫脫羧反應(yīng)，生成 α-酮戊二酸和 NADPH。NADPH 是細(xì)胞內(nèi)重要的還原型輔酶，為脂肪酸、膽固醇等生物合成提供還原力，同時維持細(xì)胞的氧化還原平衡，抵御氧化損傷。

代謝調(diào)控的核心節(jié)點

ICDHc 的活性受到多種因素的精細(xì)調(diào)控，包括底物濃度、 allosteric 效應(yīng)和共價修飾等。在細(xì)胞應(yīng)對氧化應(yīng)激、快速增殖等生理狀態(tài)時，ICDHc 活性上調(diào)，增加 NADPH 的生成，滿足細(xì)胞的合成代謝和抗氧化需求。

ICDHc 與疾病的關(guān)系

氧化應(yīng)激與抗氧化防御

ICDHc 提供的 NADPH 是細(xì)胞抗氧化防御系統(tǒng)的重要組成部分。在氧化應(yīng)激條件下，ICDHc 活性增強，促進(jìn) NADPH 生成，為谷胱甘肽還原酶等抗氧化酶提供還原力，清除活性氧（ROS），減輕氧化損傷。ICDHc 功能缺陷可能導(dǎo)致細(xì)胞抗氧化能力下降，增加氧化損傷相關(guān)疾病的風(fēng)險。

代謝性疾病

在糖尿病、肥胖癥等代謝性疾病中，ICDHc 活性異常影響脂質(zhì)代謝和胰島素信號通路。研究表明，ICDHc 活性降低可能導(dǎo)致 NADPH 生成不足，影響脂肪酸合成和代謝調(diào)控，加劇胰島素抵抗和脂毒性。

CheKine™ ICDHc 活性檢測試劑盒（微量法）工作原理

CheKine™ 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）活性檢測試劑盒采用比色法原理，利用 ICDHc 催化異檸檬酸和 NADP?生成 NADPH。NADPH 在 340 nm 處具有特征性吸光度，通過分光光度計測量吸光度值的變化，即可定量評估 ICDHc 的活性。該試劑盒操作簡便、靈敏度高、特異性強，適用于多種生物樣本，包括動植物組織、細(xì)胞培養(yǎng)物和血清等。

試劑盒應(yīng)用與研究案例

氧化應(yīng)激研究

在氧化應(yīng)激研究中，ICDHc 活性檢測可用于評估細(xì)胞的抗氧化能力。例如，在研究氧化劑對細(xì)胞損傷模型的影響時，檢測細(xì)胞中 ICDHc 活性發(fā)現(xiàn)，活性顯著降低，表明氧化劑抑制了 ICDHc 的活性，導(dǎo)致 NADPH 生成減少，細(xì)胞抗氧化能力下降。通過抗氧化劑干預(yù)后，ICDHc 活性恢復(fù)，驗證了抗氧化劑的保護(hù)作用。

代謝性疾病研究

在代謝性疾病研究中，ICDHc 活性檢測可用于探究疾病機制和篩選藥物。例如，在高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型中，檢測肝臟組織中 ICDHc 活性發(fā)現(xiàn)，活性顯著降低，伴隨著脂質(zhì)代謝紊亂和胰島素抵抗。通過使用代謝調(diào)節(jié)劑，ICDHc 活性恢復(fù)，脂質(zhì)代謝和胰島素敏感性得到改善，為代謝性疾病治療提供了潛在策略。

操作使用要點

樣本準(zhǔn)備與處理

對于動植物組織樣本，需準(zhǔn)確稱量后，利用適當(dāng)?shù)木彌_液進(jìn)行勻漿處理，確保細(xì)胞充分破裂釋放 ICDHc。細(xì)胞培養(yǎng)物和細(xì)菌樣本則需通過離心收集細(xì)胞，用預(yù)冷的緩沖液洗滌并制成勻漿。血清樣本需避免溶血和反復(fù)凍融，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

檢測步驟

嚴(yán)格按照試劑盒說明書的操作步驟執(zhí)行。首先將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品加入反應(yīng)體系，隨后依次加入檢測試劑，包括異檸檬酸、NADP?和其他輔助試劑，充分混勻后在特定溫度下孵育。孵育完成后，使用分光光度計在 340 nm 波長下測量吸光度值，并依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 ICDHc 的活性。

質(zhì)量控制與結(jié)果分析

每次檢測應(yīng)設(shè)置空白對照、陰性對照和陽性對照，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。對已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)檢測，計算其變異系數(shù)（CV），一般要求 CV 控制在一定范圍內(nèi)，如小于 10%，以確保數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

試劑盒選擇要點

檢測原理與方法對比

目前市面上有多種 ICDHc 活性檢測試劑盒，采用不同的檢測原理，如比色法、熒光法等。CheKine™ 試劑盒采用的比色法具有操作簡便、成本較低、檢測快速等優(yōu)點，適合大多數(shù)實驗室常規(guī)使用。熒光法具有更高的靈敏度和特異性，但需要配備熒光光度計。因此，在選擇試劑盒時，應(yīng)根據(jù)實驗室設(shè)備條件、實驗需求以及對檢測靈敏度和速度的要求，綜合考慮檢測原理的適用性。

樣本類型與適用范圍

CheKine™ 試劑盒適用于多種生物樣本，包括動植物組織、細(xì)胞培養(yǎng)物和血清等。在購買前，務(wù)必仔細(xì)閱讀試劑盒說明書，確保其與所檢測的樣本類型相匹配，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

靈敏度與檢測范圍評估

試劑盒的靈敏度和檢測范圍是影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素。CheKine™ 試劑盒具有較寬的檢測范圍和較高的靈敏度，能夠檢測到樣本中較低濃度的 ICDHc 活性變化。在選擇試劑盒時，應(yīng)了解其檢測靈敏度和范圍，并結(jié)合實驗中預(yù)期的樣本 ICDHc 活性水平進(jìn)行選擇。若試劑盒靈敏度不足，可能導(dǎo)致低濃度 ICDHc 樣本的檢測結(jié)果不準(zhǔn)確或假陰性，從而影響對代謝狀態(tài)或疾病機制的評估。

試劑盒品質(zhì)與穩(wěn)定性考量

選擇質(zhì)量可靠、穩(wěn)定性好的 ICDHc 活性檢測試劑盒對于保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性至關(guān)重要。在購買前，可通過查看試劑盒的用戶評價、相關(guān)文獻(xiàn)引用情況以及生產(chǎn)廠家的信譽和資質(zhì)等信息，對試劑盒的質(zhì)量和性能進(jìn)行全面評估。該產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和性能驗證，具有良好的穩(wěn)定性和批次間一致性，能夠為科研人員提供穩(wěn)定可靠的檢測結(jié)果。同時，注意試劑盒的保存條件和有效期，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行保存和使用，以確保試劑的活性和性能不受影響。