德國RETSCH公司RM100/KM100碾磨儀在酵母細(xì)胞冷凍研磨萃取中的應(yīng)用
隨著基因研究及相關(guān)分析技術(shù)的迅速發(fā)展,為萃取完整的RNA鏈和RNA序列,尋求一種快速有效的破碎酵母細(xì)胞的方法,變得越來越重要。
德國RETSCH公司推出的KM 100 /RM100研缽體研磨儀提供了一種有效的冷凍破碎酵母細(xì)胞的方法:
KM100研磨儀
- 樣品zui大進(jìn)樣尺寸：10毫米
- zui終出樣尺寸：大約0.03毫米
RM100研磨儀
- zui大進(jìn)樣尺寸：8毫米
- zui終出樣尺寸：大約0.01毫米
細(xì)胞淬取前的樣品研磨:
萃取質(zhì)量和效率的提高直接影響到樣品中蛋白質(zhì)濃縮的程度. 事實證明，在RM100/KM100研磨儀中加適量液氮的研磨方法得到的細(xì)胞樣品較其他破碎細(xì)胞方法得到的細(xì)胞樣品具有更好的萃取效果。
而萃取的結(jié)果又是染色質(zhì)聚合和RNA聚合酶 Ⅰ、Ⅲ尤其是RNA聚合酶Ⅱ的復(fù)制基礎(chǔ)，德國RETSCH公司生產(chǎn)的RM 100、KM 100型槌磨儀就可以勝任這種復(fù)雜的應(yīng)用，因為他們結(jié)合了以下優(yōu)勢：
★ 磨槌的壓力是可以調(diào)整并固定的，因此對不同的樣品可選擇研磨力度,并且研磨的結(jié)果具有高重復(fù)性；
★ 封閉的容器和研磨膛，操作潔凈并安全；
★ 寬范圍的樣品處理量：RM100為10到150毫升，KM100為300毫升；
★ 可在研磨過程中連續(xù)加入液氮,保持必要的樣品冷凍研磨，以保證在不損壞RNA, 以達(dá)到順利提取蛋白質(zhì)的目的；
使用RM100和KM100的進(jìn)行冷凍研磨的具體方法如下:
★ 將鉻鋼研缽和研槌用液氮預(yù)冷卻一段時間；
★ 將酵母細(xì)胞從塑料注射器中注射到液氮中，使樣品凍結(jié)成“面條"狀；
★ 將液氮注射到研缽中，分別開啟RM100和KM100，假如按需要預(yù)先裁切好的冷凍樣品；
★ 酵母細(xì)胞在適度研磨壓力下被磨成均勻的粉末；
★ 在整個研磨過程中，不斷加入液氮以保持研磨溫度；
★ 大約5到15分鐘后（研磨時間取決于下一步萃取想要達(dá)到細(xì)胞濃度），即可用預(yù)冷的容器回收已破碎好的酵母細(xì)胞粉末，以便下一步的萃取處理。
應(yīng)用領(lǐng)域:
酵母細(xì)胞萃取的技術(shù)在基因及相關(guān)分析的生物學(xué)領(lǐng)域中被廣泛采用。并在大量的醫(yī)學(xué)、制藥、化學(xué)實驗室研究中及食品營養(yǎng)工程技術(shù)中被采用。
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